谷氨脫羧酶定義及其結構分析 北京低*

【資料簡介】

 

谷氨脫羧酶定義及其結構分析

谷氨脫羧酶定義及其結構分析

 谷氨脫羧酶（Glutamic acid deearboxylase，GAD）能催化*鹽轉變為廣氨基丁酸（GABA），GABA是一種廣泛位于外周和中樞神經系統的神經遞質。由于GABA在大腦發育和功能上的重要作用并可能參與神經系統疾病、GAD相關性自身免疫原性硬化綜合征（Stiff-mansyndrome，SMS）和1型糖尿病的發生，因而引起了極大的興趣，人們對GAD從生物化學、神經生物學、分子生物學及免疫學等方面進行了廣泛的研究。

 

    1。定義／結構  GAD很難從大腦中純化，這一問題多年來一直困擾著GAD的研究。制備的GAD抗血清是用從9 000只鼠腦中純化出來的GAD為抗原免疫獲得的。沉淀分析法測得純化的GAD分子量為85kD，但SDS-PAGE分析顯示其含有60kD和44kD兩種成分。1973年·Wu等提出GAD分子由6個相同的15kD亞單位聚合而成，以此解釋了天然與變性后的GAD分子量的差異。以純化的GAD制備多克隆抗血清，進行免疫組化分析發現GAD可在大腦中表達，并能抑制GAD與神經元突觸小泡結合。

 

    一個有趣的發現是不同的實驗室純化的GAD分子量不同，這使人們開始關注相應抗血清的分子特異性。免疫組化的研究結果顯示上述抗血清在神經元細胞中的著染模式相似，只是抗兩個不同GAD亞型抗血清著染部位稍有不同。

 

    zui早得到的GAD基因是GAD67，是在1986年使用GAD抗血清從腦cDNA表達文庫中篩選出來的，重組GAD具有使*轉變為GABA的活性。實際上，不同分子量GAD制備的抗血清均識別大腦組織中的兩種相似的蛋白分子（GAD67和GAD65）。現已克隆出GAD65和GAD67分子。GAD67與GAD65在細胞內分布不同，前者分布于整個神經元細胞，后者則轉運至軸突末端并與膜相。大多數GAD67以有活性的全酶形式存在，而以全酶形式存在的GAD 65不到一半。GAD65無／有活性形式的水平可能調控神經末梢中GABA的含量。有研究顯示GAD與輔因子的受GAD磷酸化的調節。

對外承攬試驗：免疫組化,熒光，Tunel，Elisa，WB，

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