第三代輔助生殖技術(shù)中胚胎活檢技術(shù)環(huán)節(jié)安全性評估

【資料簡介】

第三代輔助生殖技術(shù)中胚胎活檢技術(shù)環(huán)節(jié)安全性評估
日前，中科院動物所周琪研究員領(lǐng)導(dǎo)的生殖工程研究組與南京醫(yī)科大學(xué)沙家豪教授實驗室合作，研究利用小鼠作為動物模型，按照人PGD胚胎活檢操作流程構(gòu)建了PGD活檢小鼠模型，并且對胚胎早期發(fā)育、植入率及出生情況進行了研究。通過對子代的生理表型進行長期觀察，發(fā)現(xiàn)這些小鼠在體重指標上與對照組小鼠存在差異，更重要的是在針對小鼠學(xué)習和記憶力的行為學(xué)檢測中，PGD活檢小鼠模型與對照組相比存在顯著差異。針對這種表型，采用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，對小鼠腦部蛋白質(zhì)表達進行了分析。在全部差異蛋白中，約50%蛋白與神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生具有密切的關(guān)聯(lián)。活檢組小鼠的脫髓鞘病理表型明顯增加，在髓鞘切面面積及密度上都與對照組有顯著差異。因此，研究提示活檢技術(shù)有可能誘發(fā)子代小鼠的神經(jīng)退行性疾病發(fā)生，有必要增加對輔助生殖技術(shù)中相關(guān)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)研究，建立規(guī)范的操作體系，從而將這種風險降低到zui小。

據(jù)悉，第三代輔助生殖技術(shù)在1990年獲得成功。這項技術(shù)主要針對家族遺傳病史的人群及高齡產(chǎn)婦，在其胚胎發(fā)育早期利用胚胎活檢技術(shù)去除一個卵裂球，經(jīng)分子生物學(xué)檢測后，正常的胚胎將被移入婦女子宮，而異常的胚胎將被棄掉，因此這種技術(shù)稱之為植入前遺傳診斷（Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD）技術(shù)。這項技術(shù)的重要意義在于已經(jīng)不單單是針對治療那些不孕不育人群，而是通過這項技術(shù)可以提高整體的人口出生質(zhì)量，提高人口素質(zhì)。但是針對這項技術(shù)開展的基礎(chǔ)研究還比較薄弱，特別是針對該技術(shù)在子代長期發(fā)育中是否存在潛在的風險還沒有被闡述。（

21：克隆胚胎干細胞與正常受精胚胎干細胞具有相似發(fā)育潛能
近日，北京生命科學(xué)研究所（NIBS）高紹榮實驗室與北京蛋白質(zhì)中心等合作在Proteomics雜志在線發(fā)表題為“Embryonic stem cells derived from somatic cloned and fertilized blastocysts are post-transcriptionally indistinguishable: A MicroRNA and protein profile comparison”的文章。該文章報道了使用miRNA芯片和蛋白質(zhì)組技術(shù)分析了體細胞克隆胚胎干細胞和正常受精胚胎干細胞在miRNA水平和蛋白質(zhì)表達水平，證明體細胞克隆胚胎干細胞與正常受精胚胎干細胞在轉(zhuǎn)錄后水平高度類似。

體細胞核移植可以利用特異個體的分化細胞構(gòu)建克隆胚胎從而可能得到病人特異的核移植胚胎干細胞系，已有的報道已經(jīng)在小鼠和非人靈長類中基于這種技術(shù)成功實施了治療性克隆。但是由于在克隆動物中發(fā)現(xiàn)了大量嚴重的異常表型，導(dǎo)致了人們對于治療性克隆在安全性上的擔心。雖然在轉(zhuǎn)錄水平和發(fā)育潛力上，克隆與正常受精的胚胎干細胞系沒有明顯差異，但是在轉(zhuǎn)錄后水平上的系統(tǒng)比較還是空白。為了鑒定克隆和正常受精的胚胎干細胞在轉(zhuǎn)錄后水平上是否存在差異，我們通過miRNA芯片、2-D DIGE和生物信息學(xué)方法，比較了5個克隆和相對應(yīng)的正常胚胎干細胞系的miRNA和蛋白質(zhì)的表達豐度。進一步用stem-loop RT-PCR檢測特異miRNAs的表達水平，運用質(zhì)譜分析技術(shù)進一步鑒定差異表達蛋白。我們的結(jié)果表明，在miRNA和蛋白質(zhì)表達豐度上，克隆和正常受精的胚胎干細胞是高度類似的，這些結(jié)果與它們類似的發(fā)育潛力和轉(zhuǎn)錄水平是一致的，進一步證明克隆胚胎干細胞和正常受精來源的胚胎干細胞具有高度類似的治療潛力。