現貨人分泌型免疫球蛋白AELISA 檢測試劑盒試驗原理

【資料簡介】

 人分泌型免疫球蛋白AELISA 檢測試劑盒

上海信然生物技術有限公司專業供應科研ELISA試劑盒,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,標準對照品,細胞株，提供免費代測服務，保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證，若存在質量問題，我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息，請：：謝
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試驗原理：
　　　sIgA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知sIgA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將sIgA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中sIgA的濃度呈比例關系。

自備材料：

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

樣品收集、處理及保存方法：

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 人分泌型免疫球蛋白AELISA 檢測試劑盒

操作注意事項：

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

安全性：

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 人分泌型免疫球蛋白AELISA 檢測試劑盒

試劑盒性能：

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
 
操作步驟：

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 人分泌型免疫球蛋白AELISA 檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析：

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的sIgA標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的sIgA含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度, 再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
3、檢測值范圍：0-40umol/L
4、敏感度： 0.1 umol/L

HisX6/6His/His tag（CT） 聚組氨酸抗體/抗His tag標簽抗體（C端 0.1ml
HisX6/6His/His tag（CT） 聚組氨酸抗體/抗His tag標簽抗體（C端 0.2ml
FLAG Tag （NT） FLAG Tag標簽抗體（N端） 0.1ml
FLAG Tag （NT） FLAG Tag標簽抗體（N端） 0.2ml
FLAG Tag（CT） FLAG Tag標簽抗體（C端 0.1ml
FLAG Tag（CT） FLAG Tag標簽抗體（C端 0.2ml
Mink IgG/RBITC  羅丹明標記水貂IgG 0.3ml
Rabbit IgM/RBITC 羅丹明標記兔IgM 0.3ml
Rat IgM/RBITC 羅丹明標記大鼠IgM 0.3ml
rHIL-1Ra/RBITC 羅丹明標記重組人白介素-1受體拮抗劑 0.3ml
GST-Tag （glutathione-S-transferase） 谷胱甘肽S轉移酶標簽蛋白抗體 0.1ml
GST-Tag （glutathione-S-transferase） 谷胱甘肽S轉移酶標簽蛋白抗體 0.2ml
T7 tag（recombinant T7-tagged proteins polyclonal） polyclonal）T7 tag標簽抗體 0.1ml
T7 tag（recombinant T7-tagged proteins polyclonal） polyclonal）T8 tag標簽抗體 0.2ml
V5 tag（recombinant V5-tagged proteins polyclonal） V5 tag標簽抗體 0.1ml
V5 tag（recombinant V5-tagged proteins polyclonal） V6 tag標簽抗體 0.2ml
human Fibrinogen/RBITC 羅丹明標記人纖維蛋白原 0.3ml
KLH/RBITC 羅丹明標記血藍蛋白 0.3ml
OVA/RBITC 羅丹明標記雞卵白蛋白 0.3ml
HSA（Human Serum albumin）/RBITC 羅丹明標記人血白蛋白 0.3ml
KT3 tag KT3 tag標簽抗體 0.1ml
KT3 tag KT4 tag標簽抗體 0.2ml
VSV-G tag（vesicular stomatitis virus glycoprotein） VSV-G tag標簽抗體 0.1ml
VSV-G tag（vesicular stomatitis virus glycoprotein） VSV-G tag標簽抗體 0.2ml
HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.1ml
HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.2ml
HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
Rabbit anti-pig IgG/Gold 金標記兔抗豬IgG（10nm/15nm） 1ml
Avidin/Gold 金標記親合素（10nm/15nm） 0.1ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標記重組蛋白G（10nm/15nm） 0.5ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標記重組蛋白G（10nm/15nm） 2ml
HIV-1 ENV （gp160） antigen/envelope 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
HIV-1 ENV （gp160） antigen/envelope 艾滋病病毒-包膜糖蛋白抗體 0.2ml
HLA-DR （human leukoyte Antigen DR） HLA-DR抗原抗體 0.1ml
HLA-DR （human leukoyte Antigen DR） HLA-DR抗原抗體 0.2ml
HLA-G （Human Leukocyte gen-G） 人類白細胞抗原G/組織相容性白細胞抗原G抗體 0.2ml
HLA-E （Human Leukocyte gen-E） 人類白細胞抗原E 0.2ml
Goat human Fibrinogen/RBITC 羅丹明標記羊抗人纖維蛋白原 0.3ml
phospho-14-3-3 （Ser58）  磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
phospho-4EBP1（Ser64）  磷酸化4E結合蛋白1抗體 0.1ml