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犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析

2012年06月19日 14:25:24人氣:747來源:上海天齊生物科技有限公司

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關 鍵 詞犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析,犬轉化
【資料簡介】

犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析犬轉化生長因子β1(TGF-β1)酶聯免疫分析

本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
8pg/ml-240pg/ml

使用目的:
本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關液體樣本中轉化生長因子β1(TGF-β1)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中犬轉化生長因子β1(TGF-β1)水平。用純化的犬轉化生長因子β1(TGF-β1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入轉化生長因子β1(TGF-β1),再與HRP標記的轉化生長因子β1(TGF-β1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉化生長因子β1(TGF-β1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中犬轉化生長因子β1(TGF-β1)濃度。
試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(480pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
240pg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
120pg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
600pg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
30pg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
15pg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行
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上海天齊生物科技有限公司作者

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