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如何培養(yǎng)好PC-3細(xì)胞株?
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關(guān) 鍵 詞 | PC-3復(fù)蘇,PC-3血清,PC-3技術(shù),PC-3形態(tài),PC-3來源 |
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培養(yǎng)基注意事項(xiàng):
1):每株細(xì)胞株都有它特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若使用和原先提供的培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活。
(BNL CL.2細(xì)胞信息:貼壁細(xì)胞 培養(yǎng)基、血清:90% 高糖DMEM、10% 胎牛血清)
2):更換培養(yǎng)基:視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
(BRL細(xì)胞信息:貼壁細(xì)胞 培養(yǎng)基、血清:90% DMEM高糖、10% 胎牛血清)
控制細(xì)胞分解葡萄糖(Glucose)的兩個(gè)蛋白質(zhì)對(duì)干細(xì)胞的形成非常重要。向基因組中插入了四個(gè)蛋白質(zhì)的基因,使成熟的人類細(xì)胞轉(zhuǎn)變成了類早期干細(xì)胞的狀態(tài),這一技術(shù)稱為細(xì)胞重編程(Reprogramming)。
(大鼠C6細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
重編程后的細(xì)胞有發(fā)育成任意類型細(xì)胞的能力,稱為細(xì)胞的多能性。人們一直希望由人類成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)化成的多能干細(xì)胞有朝一日能生成新的組織或器官,用以修復(fù)或替代人類的損傷組織或患病組織。
(大鼠RSC96細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠雪旺細(xì)胞)
細(xì)胞重編程過程中,它會(huì)關(guān)閉由葡萄糖產(chǎn)生能量的新陳代謝通路,該通路發(fā)生在有氧條件下的線粒體,繼而啟用無(wú)氧條件下的糖酵解通路。
(小鼠Ana-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠巨噬細(xì)胞)
能量產(chǎn)生通路的轉(zhuǎn)變對(duì)胚胎細(xì)胞和組織干細(xì)胞很重要,因?yàn)樗鼈儽仨氃诘脱醐h(huán)境下生存。研究通過對(duì)缺氧誘導(dǎo)因子1α和2α(Hypoxia-induced factor 1α and 2α,HIF1α和HIF2α)的功能缺失分析。
(人U-2 OS細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人骨肉瘤細(xì)胞)
研究發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白質(zhì)對(duì)細(xì)胞重編程產(chǎn)生干細(xì)胞是必需的,會(huì)調(diào)控一些下游基因顯著改變細(xì)胞行為。為了更詳細(xì)地了解HIF1α和HIF2α對(duì)細(xì)胞的影響,分別激活其中一種,發(fā)現(xiàn)當(dāng)HIF1α單獨(dú)被激活時(shí),細(xì)胞進(jìn)入糖酵解通路,由此產(chǎn)生更多的誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞。
(小鼠MFC細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠胃癌細(xì)胞)
然而單獨(dú)激活HIF2α時(shí),細(xì)胞不會(huì)轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞。如果同時(shí)激活HIF1α和HIF2α,HIF2α會(huì)勝出,阻斷干細(xì)胞的形成。深入挖掘發(fā)現(xiàn)HIF2α在細(xì)胞重編程初期的確能促進(jìn)細(xì)胞向糖酵解通路轉(zhuǎn)換;
(小鼠RM-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠前列腺癌細(xì)胞)
但當(dāng)該過程持續(xù)時(shí)間太長(zhǎng)時(shí),HIF2α能上調(diào)腫瘤壞死因子相關(guān)的誘導(dǎo)凋亡配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的表達(dá),該配體會(huì)誘導(dǎo)干細(xì)胞凋亡,阻斷干細(xì)胞的產(chǎn)生。因而,HIF2α既能促進(jìn)細(xì)胞多能性,也能抑制細(xì)胞多能性,這取決于細(xì)胞重編程的不同時(shí)期。
(人U87 MG細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞)
這一發(fā)現(xiàn)有助于干細(xì)胞研究。首先,可以用HIF1α大量產(chǎn)生干細(xì)胞。其次,可以單獨(dú)用HIF蛋白質(zhì)或結(jié)合其他的刺激因子誘導(dǎo)產(chǎn)生干細(xì)胞,并淘汰插入基因阻斷細(xì)胞重編程這種方法。
(猴RF/6A細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 猴脈絡(luò)叢視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)
該發(fā)現(xiàn)也有助于癌癥研究,HIF1α和HIF2α是正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為癌細(xì)胞的重要因子,事實(shí)上,活性HIF1α的存在是入侵性疾病的標(biāo)記。研究人員指出,可以通過在惡性腫瘤細(xì)胞早期阻斷HIF1α的表達(dá),或者在后期刺激HIF2α的表達(dá)來阻斷腫瘤生長(zhǎng)。
2024世環(huán)會(huì)【工業(yè)節(jié)能與環(huán)保展】

div6月3日,2024世環(huán)會(huì)【工業(yè)節(jié)能與環(huán)保展】于上海丨國(guó)家會(huì)展中[詳細(xì)]
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