一、液相色譜流動相
保持貯液瓶清潔，定期清洗或更換；盡量使用HPLC級溶劑和試劑；含有緩沖鹽和非HPLC級的流動相一定要過濾；含有緩沖鹽的流動相應現用現配，防止微生物生長和組分改變。

1、更換流動相注意事項：
液相色譜常用的流動相包括多種有機溶劑、水、各種緩沖溶液等，它們之間存在互溶性的問題，同時也存在緩沖溶液鹽析出的問題。

2、更換互溶性流動相將新流動相置于儲液瓶中：
a. 打開放空閥，啟動泵使新的流動相從放空閥出口流出20mL左右。
b. 關閉放空閥，然后將進樣閥與色譜柱相連接端卸開，用小容器放置于進樣閥的出口處。
c. 啟動恒流泵，讓流動相從進樣閥出口流出10mL左右。
d. 重新連接色譜柱，設定適當流速，當流動相流出約30倍于色譜柱體積，并且檢測器基線平衡后，流動相更換完畢。

3、更換非互溶性流動相：
a. 用中介溶劑更換泵中的舊流動相（不要接色譜柱）。
b. 如果色譜柱中流動相也需要更換，用該溶劑沖洗色譜柱。
c. 用新流動相更換中介溶劑。

4、更換緩沖液流動相：
a. 用5%～20%甲醇水更換色譜系統中緩沖液(包括色譜柱) 。(非常重要)
b. 用新流動相更換過渡溶劑。
c. 由于一般緩沖液遇到甲醇、異丙醇等高含量有機溶劑混合液時容易將緩沖液中的鹽結晶出來，而結晶鹽對密封圈、柱塞桿以及進樣閥內部轉子和定子都有很大的損壞，也容易阻塞*，因此要特別仔細操作。
d. 用緩沖液作流動相或一段時間不使用泵，照以上步驟更換溶劑，然后用純甲醇或乙腈沖洗。

二. 泵頭

泵的密封圈是泵zui容易磨損的部件

1、泵的密封圈的維護保養：
每天要把泵中的緩沖液沖洗干凈，防止鹽沉積；用HPLC級試劑；用燒結不銹鋼吸液過濾頭；

2、進樣閥
zui易磨損：轉子密封

3、保養事項：
a、樣品進樣前要過濾；
b、停機后要用溶劑沖洗干凈進樣器內殘留樣品和緩沖鹽；
c、不要用氣相色譜用的尖頭針進樣。

4.  檢測器
保持檢測器清潔，每天與色譜柱一同清洗；
用脫過氣的流動相，防止空氣卡在檢測池內；
檢測器燈有一定壽命，不用時不要打開燈。但也不能
夠經常開關燈。

三、液相系統常見故障排除方法
1、泵易出現的問題：
泵流速變小、柱壓低或不吸液流量不穩或壓力不穩漏液壓力顯示過高；泵流速變小、柱壓低的原因泵內有氣泡；溶劑過濾器阻塞；入口單向閥過濾片阻塞；泵中兩種溶劑不互溶；柱塞密封泄漏；連接管路泄漏。流量不穩或壓力不穩的原因泵頭內聚集了氣泡；泵中溶劑分層；泵頭失靈；入口單向閥污染；*漏液或部分堵塞。

2、漏液的原因
流動相從主副泵頭清洗管流出：由于密封圈內環表面和柱塞桿表面粘有異物；流動相從泵頭和定位套間漏液：密封圈外環密封不好；連接問題。

3、泵壓力顯示過高的原因
在線過濾器堵塞；進樣閥堵塞；色譜柱本身壓力增高；紫外檢測器入口管路堵塞。

4、泵中氣泡的排除
初次、長時間沒有使用、流動相脫氣效果不好等情況下系統內會出現氣體，導致壓力不穩、流速不穩甚至不能輸液等問題。輸液管中的氣泡可通過用泵的沖洗功能或者用注射器在放空閥排出；如果輸液管中無氣泡，流路中仍然無液體流出，可能是閥球閥座粘連，取出單向閥，向單向閥兩端分別吹氣，一通一堵為正常，兩端均堵說明閥球閥座粘連，需清洗閥球閥座。

5、在線過濾器及濾頭的清洗
將在線過濾器和濾頭拆下，浸入20-30%硝酸溶液中，超聲30分鐘，取出用水洗凈既可。如果使用的是正相系統，注意將在線過濾器烘干后使用。

6、對柱塞桿的清洗
注意經常用蒸餾水沖洗柱塞桿后部的管路，避免鹽結晶在上面，從而損傷密封圈和柱塞桿，導致泵體漏液。

7、單向閥清洗
取下密封墊，將閥球、閥座、限位套倒入盛乙醇的小燒杯中在*清洗閥組件(用放大鏡觀察清洗后的閥球、閥座，如果有損壞，請換新的閥球、閥座)；清洗后將閥件按要求裝入閥體(注意每組閥座的方向)，在上面壓住密封墊圈。每組閥球、閥座不能互換，否則影響密封性能。閥組裝好后，可用吹氣的方法檢查安裝的是否正確。從標記環一端吹氣，空氣可以通過閥體，而在另一端吹氣，空氣應無法通過閥體。

8 、檢測時易出現的問題
a. 基線噪聲
b. 基線漂移
c. 工作站出現大的尖峰
d. 負峰
e. 工作站信號階梯式上升
f. 隨泵運動出現噪聲
g. 峰高或者峰面積重復性差
h. 分析準確度差

9、基線噪音
樣品或檢測池污染；樣品或參比池中有氣泡；記錄儀或裝置接地不良；檢測器光源故障；連接件泄露；很小的氣泡通過檢測池；由泵的脈動引起的規則脈沖；有微粒通過檢測池；進樣閥樣品環部分堵塞；氘燈壽命到限。

10、基線漂移
檢測池污染；檢測池內小氣泡；柱污染或固定相流失；檢測器溫度變化；檢測器光源故障；原先的流動相未*置換；溶劑儲瓶污染；強吸附的組分從色譜柱中洗脫下來；微粒造成進樣閥柱頭部分堵塞；溶劑分層。出現很大的尖峰檢測池內有氣泡通過-溶劑脫氣并*沖洗系統；檢查連接系統是否漏液；記錄儀或檢測器接地不良-消除噪聲來源；確保良好接地；樣品溶解不*-更換樣品溶劑。

四、負峰
檢測器輸出信號的極性相反；樣品的吸收小于流動相，流動相不純；樣品溶劑干擾；示差折光檢測器中樣品的折射率較低；進樣中帶入氣泡。

1、信號階梯式上升
檢測器的輸出范圍設定不當-重新設定檢測器的輸出范圍。記錄儀或檢測器接地不良-確保良好接地。吸收過大，平頭峰-稀釋樣品。

2、基線隨著泵的往復出現噪音，儀器處于強空氣中或流動相脈動，改變儀器放置位置，放在合適的環境中。用一調節閥或阻尼器以減少泵的脈動。

3、峰高或峰面積重復性差
進樣體積不重復-保證*充滿定量管；檢測器響應不正常；記錄儀或工作站不正常；柱或檢測器被樣品超載；校準液或樣品溶液或內標物分解；保留時間不重復；溶質與固定相作用；色譜柱填充不良。

4、 分析的準確度差
校準不適當；校準液或樣品溶液或內標物分解；對內標物或欲測組分有未知干擾；溶質與固定相作用。

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