2、結果
2.1　給藥途徑對胎盤組織IL26表達的影響陽性反應主要位于絨毛膜層和其近蛻膜的區域。給藥后第1、2、3天,胎盤組織IL26表達水平,各給藥組低于相應的對照組P<0.05,羊膜腔內給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內對照組高于母鼠靜脈給藥組P<0.05。其在給藥組給藥后第2天較低P<0.05,在對照組呈逐漸增長的趨勢P<0.05。
2.2　給藥途徑對胎盤組織MMP29表達的影響陽性反應主要分布于絨毛膜層和靠近蛻膜的區域。胎盤MMP29表達水平在給藥后第1、2、3天,各給藥組低于各相應對照組P<0.05,羊膜腔內給藥組低于母鼠靜脈給藥組P<0.05,羊膜腔內對照組高于母鼠靜脈對照組P<0.05。各組MMP29表達水平逐日升高P<0.05。
3　討論
IL26是一種多能炎性細胞因子,與炎癥反應密切相關。IL26產生于滋養細胞,且其受體也存在于滋養細胞表面,宮內感染時,細菌侵犯羊膜腔,刺激蛻膜、羊膜和絨毛膜細胞及胎兒產生大量的IL26等細胞因子,可促使PGE分泌,引起子宮收縮和促進宮頸成熟,引起早產。有學者認為,IL26是感染的急性期反應的標志物,其水平甚至可以直接反應病原體的侵入。本實驗結果顯示,給藥組胎盤組織IL26表達水平較低,是為*鈉抗菌作用的體現。給藥途徑不同,導致了羊水即時藥物濃度和其峰值以及藥物代謝過程的差異,我們推測,羊膜腔內給藥后,羊水中的藥物濃度瞬時升高至峰值,并可通過擴散、轉運以及羊膜的析出等方式達胎盤,迅速抑制宮內大腸埃希菌的生長和繁殖,從而減輕感染帶來的炎癥反應,因此,羊膜腔內給藥組胎盤組織IL26表達水平均低于母鼠靜脈給藥組,而羊膜腔穿刺對宮內環境的影響是羊膜腔內對照組較母鼠靜脈對照組更高表達的主要原因。
IL26參與妊娠的全過程,并隨孕期而增長,其在孕中、晚期保持一種相對穩定的水平,在分娩發動前明顯升高。本研究顯示,給藥后由于抗菌素的作用,胎盤組織IL26表達于給藥后第2天較低,此后呈增長態勢,對照組炎性反應程度逐漸增強,IL26水平逐漸上升,這與前人的研究結果保持一致。
基質金屬蛋白酶MMPs是一族內源性蛋白水解酶,能夠降解細胞外基質的多種成分,參與細胞外基質的代謝,與組織重塑有關,并通過調節細胞外基質的含量和胎膜結構,與胎膜破裂關系密切。MMP29激活后,促進包括Ⅳ型膠原在內的胞外基質快速崩解引發細胞發生形態學變化和引發凋亡,其在分娩、破膜、羊膜腔感染的羊水標本中明顯升高。與IL26表達差異原因相同,給藥組MMP29表達水平較低,羊膜腔內給藥組低于母鼠靜脈給藥組,羊膜腔內對照組高于母鼠靜脈對照組。Locksmith[8]認為,從孕中期至孕末期MMP29一直處于相對穩定的較低水平,MMP29的出現和快速增高預示著胎膜即將破裂。又有學者指出感染或炎癥過程中產生的IL26等分泌增加可以誘導或激活MMP29活性,故本實驗各組胎盤MMP29表達水平逐日增高是感染炎癥刺激和妊娠進展共同作用的結果。
目前,羊膜腔途徑給藥作為侵入性操作尚未被臨床廣泛采用,僅胎兒宮內換血治療被認可,宮內操作導致宮內感染風險增加以及胎兒胎盤損傷、早產等副作用使得羊膜腔給藥途徑的研究和應用滯后,上尚無羊膜腔內給藥治療宮內感染的實驗及臨床研究。然而,羊膜腔途徑給藥可以繞過胎盤屏障直接進入羊水,羊膜腔內注射氨基酸治療胎兒宮內生長受限成功的報道更堅定了我們探討羊膜腔內給藥治療細菌性宮內感染的決心。本實驗結果提示,單次*鈉給藥治療晚孕SD大鼠大腸埃希菌宮內感染,羊膜腔內較母鼠靜脈途徑更有效,其可通過抑制IL26和MMP29在胎盤組織中的表達水平,降低炎癥反應程度和胎膜早破的風險。