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人總*(TC)ELISA試劑盒說明書

2009年11月21日 16:54:23人氣:1231來源:廈門慧嘉生物科技有限公司

總*(TCELISA試劑盒說明書

本試劑盒僅供研究使用。

藥品名稱:

通用名:總*(TC酶聯(lián)免疫分析試劑盒

使用目的:

本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中總*(TC含量。

實驗原理

本試劑盒應用間接法測定標本中人總*(TC水平。用純化的人總*(TC抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的總*(TC標準品和未知濃度的總*(TC待檢樣品,溫育后,加入*標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總*(TC呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人總*(TC濃度。

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

50ml×1

 

 

9

標準品S118 nmol/L

0.5ml×1

2

鏈霉親和素-HRP

6ml×1

標準品S212 nmol/L

0.5ml×1

3

酶標包被板

12孔×8

標準品S36 nmol/L

0.5ml×1

4

*標記的抗-IgG抗體

6ml×1

標準品S43 nmol/L

0.5ml×1

5

顯色劑A

6ml×1

標準品S51.5nmol/L

0.5ml×1 

6

顯色劑B

6ml×1/

10

密封袋

1

7

終止液

6ml×1

11

封板膜

3

8

樣品稀釋液

6ml×1

12

說明書

1

 

標本要求

1不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

操作步驟

1.       根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

2.       加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。然后在標準品孔中加入標準品50μl,在樣本反應孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品zui終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。

3.       配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

4.       洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。

5.       加*標記的抗-IgG抗體:每孔加入*標記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘

6.       洗滌:操作同4。

7.       加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

8.       洗滌:操作同4

9.       顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.

10.   終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.   測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

 

計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

注意事項

 

線形范圍:

1nmol/L -20nmol/L

規(guī)格:

96人份/

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8

2.有效期:6個月

 

廈門慧嘉生物科技有限公司專業(yè)代理眾多生命科學領(lǐng)域的。致力于各種ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、一抗二抗、細胞因子、生物試劑、移液器、耗材的銷售推廣及服務(wù)工作。
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總*(TCELISA試劑盒說明書

關(guān)鍵詞:酶標儀 移液器
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