ppar試劑盒實(shí)驗(yàn)原理說明
實(shí)驗(yàn)原理:本ppar試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中(產(chǎn)品名稱)水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品,再與HRP標(biāo)記的其抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中產(chǎn)品的濃度。
試劑盒組成:
、30倍濃縮洗滌液20ml×瓶7 終止液 6ml×瓶
2、酶標(biāo)試劑 6ml×瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品(240ng/L) 0.5ml×瓶
3、酶標(biāo)包被板 2孔×8條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 .5ml×瓶
4、樣品稀釋液 6ml×瓶0 說明書 份
5、顯色劑A液 6ml×瓶 封板膜 2張
6、顯色劑B液 6ml×/瓶2 密封袋 個(gè)
標(biāo)本要求:
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本ppar試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
20ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 50μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60ng/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 50μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30ng/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 50μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5ng/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 50μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5ng/L號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 50μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
操作程序總結(jié):
.準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應(yīng)0分鐘
5.加入終止液
6.5分鐘之內(nèi)度OD值
7.計(jì)算
YSRIBIO4298 驢透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit ,英文名: Donkey hyaluronic acid,HA ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4299 驢卵泡刺激素(FSH)ELISA Kit ,英文名: Donkey Follicle-Stimulating Hormone,FSH ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4300 驢黃體生成素(LH)ELISA Kit ,英文名: Donkey Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO430 驢雌二醇(E2)ELISA Kit ,英文名: Donkey Estradiol,E2 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4302 鹿ELISA Kit
YSRIBIO4303 鹿胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-)ELISA Kit ,英文名: Deer Insulin-like growth factors ,IGF- ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4304 鹿尿酸氧化酶ELISA Kit ,英文名: Deer Urateoxidase ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4305 鹿免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit ,英文名: Deer Immunoglobulin A,IgA ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
YSRIBIO4306 鹿黃嘌呤氧化酶(XOD)ELISA Kit ,英文名: Deer Xanthine Oxidase,XOD ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T