P-選擇素ELISA試劑盒使用說明書

ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：
P-selectin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知P-selectin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將P-selectin和標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中P-selectin的濃度呈比例關(guān)系。

ELISA試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制
96/48人份酶標(biāo)板塊板（96T）半塊板（48T）即用型
塑料膜板蓋塊半塊即用型
標(biāo)準(zhǔn)品：400pg/ml瓶（0.6ml）瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀
空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β對照瓶（.0ml）瓶（0.5ml）即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液瓶（5ml）瓶（2.5ml）即用型
標(biāo)記的抗P-selectin抗體瓶（6ml）瓶（3.0ml）即用型
親和鏈酶素-HRP瓶（0ml）瓶（5.0ml）即用型
洗滌緩沖液瓶（20ml）瓶（0ml）按說明書進(jìn)行稀釋
底物A瓶（6.0ml）瓶（3.0ml）即用型
底物B瓶（6.0ml）瓶（3.0ml）即用型
終止液瓶（6.0ml）瓶（3.0ml）即用型
標(biāo)本稀釋液瓶（2ml）瓶（6.0ml）即用型

自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

ELISA試劑盒安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。