試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

0.6μg/L -16μg/L

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中25羥基*3（25（OH）D3）含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人25羥基*3（25（OH）D3）水平。用純化的人25羥基*3（25（OH）D3）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入25羥基*3（25（OH）D3），再與HRP標記的25羥基*3（25（OH）D3）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的25羥基*3（25（OH）D3）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人25羥基*3（25（OH）D3）濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品（32μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張 

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

16μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

8μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

4μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

公司相關產品：

小鼠粘蛋白/粘液素7（MUC7）ELISA試劑盒  Mouse Mucin-7,MUC7 ELISA試劑盒
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（ECP）ELISA試劑盒  Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA試劑盒 
小鼠Qa淋巴細胞抗原2（Qa-2）ELISA試劑盒  Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA試劑盒
小鼠D-乳酸脫氫酶（D-LDH）ELISA試劑盒  Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA試劑盒 
小鼠孕酮受體（PROGR）ELISA試劑盒  Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA試劑盒
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6（IGFBP-6）ELISA試劑盒  Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA試劑盒 
小鼠肺部活化調節趨化因子（PARC/CCL18）ELISA試劑盒  Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA試劑盒
小鼠*（LZM）ELISA試劑盒  Mouse Lysozyme,LZM ELISA試劑盒 
小鼠β連環蛋白/聯蛋白（β-Cat）ELISA試劑盒  Mouse β-catenin,β-cat ELISA試劑盒
小鼠骨退化特異標志物（CTX-2）ELISA試劑盒  Mouse CTX-2 ELISA試劑盒
小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽（PACAP）ELISA試劑盒  Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA試劑盒 
小鼠血管緊張素轉化酶（ACE）ELISA試劑盒  Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅱ（ANG-Ⅱ）ELISA試劑盒  Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA試劑盒
小鼠角化細胞內分泌因子（KAF）/雙調蛋白（AR）ELISA試劑盒  Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA試劑盒
小鼠活化素A（ACV-A）ELISA試劑盒  Mouse Activin A,ACV-A ELISA試劑盒
小鼠腦源性神經營養因子（BDNF）ELISA試劑盒  Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白2（BMP-2）ELISA試劑盒  Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白4（BMP-4）ELISA試劑盒  Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA試劑盒
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6（IGFBP-6）ELISA試劑盒  Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA試劑盒 
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ（MIP-1δ/CCL15）ELISA試劑盒  Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1δ,MIP-1δ ELISA試劑盒 
小鼠肺部活化調節趨化因子（PARC/CCL18）ELISA試劑盒  Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA試劑盒
小鼠*（LZM）ELISA試劑盒  Mouse Lysozyme,LZM ELISA試劑盒 
小鼠可溶性CD30（sCD30）ELISA試劑盒  Mouse soluble cluster of differentiation 30,sCD30 ELISA試劑盒
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2（sMHC-2）ELISA試劑盒  Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA試劑盒
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1（sMHC-1）ELISA試劑盒  Mouse soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA試劑盒
小鼠粘蛋白/粘液素C（MUCC） ELISA試劑盒  Mouse Mucin-5 subtype AC,MUCC ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素轉化酶（ACE）ELISA試劑盒 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅱ（ANG-Ⅱ）ELISA試劑盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA試劑盒
小鼠角化細胞內分泌因子（KAF）/雙調蛋白（AR）ELISA試劑盒 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA試劑盒
小鼠活化素A（ACV-A）ELISA試劑盒 Mouse Activin A,ACV-A ELISA試劑盒
小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPO-Ab）ELISA試劑盒  Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA試劑盒 
小鼠腦源性神經營養因子（BDNF）ELISA試劑盒 Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA試劑盒
小鼠凋亡誘導因子（AIF）ELISA試劑盒  Mouse apoptosis inducing factor,AIF ELISA試劑盒 
小鼠骨成型蛋白2（BMP-2）ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白4（BMP-4）ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白受體1A（BMPR-1A）ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA試劑盒
小鼠堿性磷酸酶（ALP）ELISA試劑盒  Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA試劑盒
小鼠血管生成素4（ANG-4）ELISA試劑盒  Mouse Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ（BMPR-Ⅱ）ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類（MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ）ELISA試劑盒 Mouse major histocompatibility complex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA試劑盒
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白（E-Cad）ELISA試劑盒 Mouse E-Cadherin,E-Cad ELISA試劑盒
小鼠CD30分子（CD30）ELISA試劑盒 Mouse Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒  Mouse major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA試劑盒
小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒 Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA試劑盒
小鼠嗜酸粒細胞趨化因子（ECF）ELISA試劑盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA試劑盒
小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1（Eotaxin 1/CCL11）ELISA試劑盒 Mouse Eotaxin 1 ELISA試劑盒
小鼠紅細胞生成素（EPO）ELISA試劑盒 Mouse Erythropoietin,EPO ELISA試劑盒
小鼠E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA試劑盒  Mouse E-Selectin ELISA試劑盒