多肽的保存使用說(shuō)明

多肽是α－氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。由兩個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。它們的分子量低于10，000Da（Dalton道爾頓），能透過(guò)半透膜，不被三及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。

特點(diǎn)
　　傳統(tǒng)獲得肽的方法有很多。傳統(tǒng)法主要有：酸法、堿法、電法、人工嫁接法、基因表達(dá)法等。但在工藝技術(shù)方面，這些合成工藝方法的局限性，是導(dǎo)致其這些合成方法沒(méi)有產(chǎn)品的原因。

多肽保存：
　　大多肽在-20℃很穩(wěn)定，特別是冷凍干燥并保存在干燥器中，在將它們暴露于空氣之前， 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少，當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí)，的方法是以小的工作樣量存放。
對(duì)于含Cys, Met orTrP的多肽，脫氧緩沖劑對(duì)其溶解*，因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化， 在封瓶前，慢慢流過(guò)多肽的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解，所有這些肽與不含這些有問(wèn)題解苷的那些肽相比，生命期有限。
溶解性：
　　大多肽的道選溶劑是超純抽氣水。人C多肽試劑盒 稀乙酸或氨水分別對(duì)于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽， 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle來(lái)溶解，這些溶劑可能某些實(shí)驗(yàn)有副作用。所以我們建議設(shè)計(jì)多肽時(shí)要加注意。
殘基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val將全增加多肽的溶解難度。
您需要特殊的多肽或任何技術(shù)幫助，請(qǐng)隨時(shí)與我們。 我們包你*滿意，對(duì)于我們不能適當(dāng)合成的順序，我們不收費(fèi)。

多肽的保存和操做

　　包裝 1mg或更少的多肽按凈重包裝，聲明的小瓶重不含相關(guān)抗離子和水。 例如，氨基酸分析決定的肽含量是80%， 在1mg樣品中，那么瓶中毛重是1.25mg。
大量的多肽以毛重算。標(biāo)出的重量含相關(guān)抗離子和水， 例如，25mg樣品中肽百分比為90%，那么，實(shí)際肽量為25mg×90%=22.5mg
不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%， 而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)（如Arg, Lys ）的抗離子量和肽新水性決定。這是合成肽的本身特性。

凍干肽的保存
　　所有產(chǎn)品應(yīng)存于冰箱， 為-20℃。多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變。

肽溶液的保存
　　溶液肽遠(yuǎn)比凍干形式不穩(wěn)定，溶液應(yīng)為中性pH（pH5-7）, -20℃保存的，為避免樣品的反復(fù)凍融， 分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完， 應(yīng)扔掉，細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩， 為克服此，肽應(yīng)溶于無(wú)菌水， 或肽溶液用0.2μ M濾膜過(guò)濾。

多肽的重建和操作

　　多數(shù)肽溶于無(wú)菌蒸溜水。初次溶解時(shí)，要注意使初始濃度比要求濃度大，如果多肽僅有限溶解性， 這便允許加入其它溶解劑或緩沖鹽。
如果多肽在水中的溶解性有限，有幾種選擇可幫助溶解：
對(duì)堿性肽用稀乙酸（含Arg , Lys , His）
酸性肽用稀氨水（含Asp, Glu）
對(duì)極疏水的肽用10%有機(jī)修飾物（Acetonitnile , Methanol）
極不溶的肽用DM50或DMF
guanicline hydrochloride或脲的濃溶液也很有用，人多肽YY（Peptide-YY）ELISA試劑盒  與上述方法合用， 聲處理也是溶解多肽的有效手段。

多肽的包裝
　　目錄中所有多肽除特別說(shuō)明外，純度為95~98%。包裝為小瓶?jī)龈煞邸?除特別注明外，多肽凈重包裝， 例如，1mg瓶的β-amyloid 1-40含1mg的多肽。多肽凈重由氨基酸分析得到的肽含量計(jì)算。例如， 一個(gè)多肽樣品毛重5mg，氨基酸含量85%， 多肽凈重為5mg×0.85=4.25mg。請(qǐng)注意， 多肽含量不是多肽純度，與抗離子象乙酸鹽和溶劑，特別是水結(jié)合量合成多肽的本身特性。多肽純度可能達(dá)100%， 但合成品中多肽含量由氨基酸組成，硫水性， 和多肽對(duì)溶劑和離子的暴露決定，特別是在純化過(guò)程中， 無(wú)論多肽如何純，凍干粉多肽含量一般為70-85%。 剩余15-30%由其它基本非肽成份構(gòu)成。

多肽應(yīng)用和保存
　　多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問(wèn)題是形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。除了zui太肽外，這點(diǎn)都會(huì)發(fā)生， 在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會(huì)促進(jìn)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在無(wú)菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。如需要增加溶解率， 可用聲處理。溶解仍有問(wèn)題， 加少量稀乙酸（10%）或氨水，會(huì)便于溶解。
要長(zhǎng)期保存多肽， 冷凍干燥，冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無(wú)降解。溶液中的多肽遠(yuǎn)不穩(wěn)定。 多肽易受細(xì)菌降解，應(yīng)用無(wú)菌純化水溶解。
含有Met, Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化，壽命有限。應(yīng)溶于無(wú)氧溶劑， 為防止重復(fù)凍融的破壞， 建議溶解過(guò)量的肽的便實(shí)驗(yàn)，其余多肽以固體形成保存。

固相多肽合成Fmoc方法

　　任何多肽鏈的關(guān)鍵連接為肽鍵，由一個(gè)氨基酸的氨基與另氨基酸的縮合形成。通常一個(gè)氨基酸由一個(gè)中心碳原子組成，它由四個(gè)基它基團(tuán)包圍： 氨基、羰基、基和側(cè)鏈。 側(cè)鏈，稱為R，區(qū)別不同氨基酸的結(jié)構(gòu)。某些側(cè)鏈含有干擾肽鍵形成的功能團(tuán)。因此側(cè)鏈功能團(tuán)的封閉很重要。
圖工顯示了Fmoc合成的一般流程，首先*個(gè)Fmoc氨基酸通過(guò)一個(gè)酸性接頭接到不溶載體樹(shù)脂上，F(xiàn)moc去保護(hù)通過(guò)用堿處理樹(shù)脂來(lái)完成，一般是Poperidine。 用預(yù)先激活或原位激活連接第二個(gè)Fmoc氨基酸。要求總多肽合成后，通過(guò)TFA分離來(lái)除去樹(shù)脂和去保護(hù)。

Fmoc分離

固相多肽合成中多肽分離主要用酸解

Fmoc法用弱酸，比如TFA或TMSBr。各種添加劑， 一般為thiol compound , 水和酚，用來(lái)保護(hù)多肽的免分離中Carbocation的破壞。