人心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）elisa試劑盒使用說明書

Elisa kit規格：48孔配置/96孔配置

標準品稀釋液：1.5ml×1瓶

酶標試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【人心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用 

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）水平。用純化的人心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1），再與HRP標記的心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）濃度。

目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中心肌肌凝蛋白輕鏈1（CMLC-1）的含量。

操作步驟

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

上海將來試劑網專業經銷生命科學領域，質量保證，供應各*Elisa試劑盒，以zui合理的價格為廣大客戶提供高質量的免疫學和生命科學相關產品其質量被全國各大院?？蒲袡C構認可，為科研試劑長期供應商，咨詢訂購！

更多高品質科研試劑產品請登錄：