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雞水通道蛋白5ELISA試劑盒操作原理
點擊次數:629 發布時間:2012-7-3
Agre等(1988)在分離純化紅細胞膜上的Rh多肽時,發現了一個28kD的疏水性跨膜蛋白,稱為形成通道的整合膜蛋白28(channel-forminginte—gralmembraneprotein,CHIP28),1991年完成了其cDNA克?。╒erkman,2003)。但當時并不知道該蛋白的功能,在進行功能鑒定時,將體外轉錄合成的CHIP28eDNA注入非洲爪蟾的卵母細胞中,發現在低滲溶液中,卵母細胞迅速膨脹,并于5min內破裂。為進一步確定其功能,又將其構于蛋白磷脂體內,通過活化能及滲透系數的測定及后來的抑制劑敏感性等研究,證實其為水通道蛋白。從此確定了細胞膜上存在轉運水的特異性通道蛋白,并稱CHIP28為Aquaporinl(AQPl)。
水通道蛋白即蛋白質在膜內,形成專門輸送水的穿膜通道,存在于紅細胞和腎組織中,由4和腎組織中,由4個相同的亞基組成,每個亞基(28kDa)含個亞基(28kDa)含6個穿膜α穿膜α螺旋,極大地增加膜的水通透性。
水通道蛋白是專門運輸水的跨膜蛋白,其基因結構、基因表達調控、染色體定位、蛋白質結構、組織分布和生理功能得到了較為深入的研究。到目前為止,在哺乳動物至少發現有13種到目前為止,在哺乳動物至少發現有13種水通道蛋白,即AQPo~12(Preston等,水通道蛋白,即AQPo~12(Preston等,1992)
生物體的主要組成部分是水溶液,水溶液占人體重量的70%。生物體內的水溶液主要由水分子和重量的70%。生物體內的水溶液主要由水分子和各種離子組成。它們在細胞膜通道中的進進出出可以實現細胞的很多功能。
雞水通道蛋白5,佛山雞水通道蛋白5ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞水通道蛋白5水平。用純化的雞水通道蛋白5抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入水通道蛋白5,再與HRP標記的水通道蛋白5抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的水通道蛋白5呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞水通道蛋白5濃度。
另外,利用不同的細胞膜通道,可以調節細胞的功能,從而達到治療疾病的目的。中藥的一個重要功能是調節人體體液的成中藥的一個重要功能是調節人體體液的成分和不同成分的濃度,這些成分可以通過不同細胞膜通道調節細胞的功能。有專家認為,對細胞膜通道的研究可以為揭示中認為,對細胞膜通道的研究可以為揭示中醫藥的科學原理提供重要的途徑。醫藥的科學原理提供重要的途徑。