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山羊超氧化物歧化酶ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù):443 發(fā)布時(shí)間:2012-10-11
產(chǎn)品類型:ELISA試劑盒
大小:96T
種類:山羊
目標(biāo)名稱:
超氧化物歧化酶,可溶性
檢測時(shí)間:1-5H
樣品體積:50-100ul
檢測wavelengt:450nm處
采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。為SOD1的特定抗體已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何的SOD1目前的固定抗體的約束。*共軛的抗體特異性的SOD1除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經(jīng)過洗滌,以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,顯色成比例的量的初始步驟中的約束的SOD1。彩色顯影被停止并測量的顏色的強(qiáng)度。
在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測定一式兩份。
1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
2。請確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測。
4。每孔中取出的液體,不洗。
5。向每孔中加入100μl*抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí),在37℃下(*抗體(1X)可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)
6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對干凈的紙巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下
8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。
9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光
10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板,以確保充分混合。
11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度。如果波長校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會(huì)比較高,不太準(zhǔn)確。
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