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士鋒生物結核桿菌的檢測

時間:2014-3-25閱讀:1300
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結核桿菌與麻風桿菌是分枝桿菌屬中的主要病原菌。
結核桿菌菌體細長略帶彎曲,有分枝生長趨勢。
菌體含脂量高,與其抗酸特性、抵抗力特性、致病性與免疫性等都有密切關系。
該菌營養(yǎng)要求高,生長緩慢,形成“菜花狀”菌落。 

一、結核桿菌檢驗程序 

結核病人病灶中查到結核桿菌,是病原學診斷的重要依據(jù),根據(jù)感染部位不同,可采集病人的痰、尿、糞便、腦脊液、胸腹水、胃液等,按以下程序進行檢驗。

二、結核桿菌培養(yǎng)特性 
1. 液體培養(yǎng)基(蘇通氏培養(yǎng)基、小川培養(yǎng)基、血清酸性培養(yǎng)基等)結核桿菌生長表現(xiàn):標本材料經(jīng)前處理(即酸堿處理,可液化標本,也可殺死雜菌,還可濃縮集菌)后接種液體培養(yǎng)基,35℃培養(yǎng)1-2周,由于表面生物,可在培養(yǎng)基表面表成污灰、干燥、有皺褶的菌膜。 
2. 固體培養(yǎng)基(改良羅氏培養(yǎng)基、丙酮酸鈉培養(yǎng)基等)結核桿菌生長表現(xiàn):標本材料經(jīng)前處理后,接種固體培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)2-4周,在培養(yǎng)基表面可形成乳白或米黃色、不透明、粗糙顆粒狀或節(jié)狀堆聚的菌落,呈現(xiàn)“菜花狀”。 
3. 結核桿菌快速培養(yǎng)檢測方法:無菌手續(xù)將前處理后的材料涂片,置液體培養(yǎng)基中,35℃恒溫箱CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng),3-5日后,每隔日取出一玻片,染色鏡檢,可快速獲得結果。 
三、齊一尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法(操作) 
【原理】 
結核桿菌對苯胺染料不易著色,若加溫或延長染色時間使其著色后,再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色,再經(jīng)美蘭復染,結核桿菌及其他分枝桿菌仍呈紅色,而非抗酸菌和細胞雜質等呈藍色。 
【材料】 
1. 結核病人痰液:采取清晨*口粘痰,或濃縮集落菌法處理過的痰標本。 
2.抗酸染色液 
3. 載物玻片、玻片夾、酒精燈、臘筆等。

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