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藥敏紙片說明書（擴散法<K-B>法）

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藥敏紙片說明書（擴散法<K-B>法）

【產品名稱】通用名稱：藥敏紙片（擴散法<K-B法>）

【包裝規格】20片/瓶

【預期用途】用于用于高等院校、科研機構等科研使用（抗微生物藥物敏感性試驗）。

【檢驗原理】藥敏試紙含帶的藥物經溶解向培養基周圍擴散，形成同心圓濃度梯度，在一定濃度范圍內

可抑制敏感菌的生長，形成抑菌環。該抑菌環直徑的大小與該抗菌藥物的低抑菌濃度（MIC）成反比。即通過紙片擴散試驗所測的抑菌環直徑的大小，并參照《全國臨床檢驗操作規程》或CLSI《抗菌藥物敏感性試驗執行標準》判斷檢測菌敏感、中介或耐藥情況。

【主要組成成份】直徑為6.0~6.35mm的藥檢紙，含微量抗生素稀釋液。

【儲存條件及有效期】-20~8°C保存，避光密封貯存，有效期為十二個月。

【樣本要求】待測菌應為生長在無選擇性瓊脂平板上的新鮮純菌落。

【檢驗方法】 a 冰箱內取出的試紙瓶需放置恒溫后方可打開，防止冷熱水凝結造成紙片受潮。

b 用接種環挑取18~24h培養的新鮮菌落于3~10ml無菌用水內，調制成相當于 0.5麥氏

標準的細菌濃度（務必于15min內使用）

c 用無菌棉拭子沾取菌液，并經管壁旋轉擠壓去除過多的菌液，均勻涂抹于MH培養基表

面（培養基厚度約為4mm），以不同角度涂抹3次，然后沿平皿內緣涂抹一周，蓋上皿

蓋，置室溫干燥3~5min后用鑷子將藥敏試紙貼于培養基面上（9cm的平皿可貼6片）。

紙片貼牢后避免再次移動。

d 蓋上蓋子，倒扣置培養箱內孵育（一般為18~24h）后取出。

e 用游標卡尺量取抑菌環直徑，對照判讀標準判讀結果。

【檢驗結果的解釋】

敏感（S）：是指菌株能被常規劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。

中介（I）：常規劑量在感染部位可達到的濃度，不是敏感性的度量；還可作為

緩沖區，為防止有微小技術因素失控導致的結果偏差。

耐藥（R）：是指菌株不能被常規劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。

【檢驗方法的局限性】僅用于科研標本的藥物敏感性試驗。

【產品性能指標】

外觀：微生物藥敏試紙的包裝應整潔，標簽圖案與文字清晰無誤；藥敏紙片呈圓形，邊緣無缺口，表面平滑，無裂痕；紙片兩邊均有抗菌藥物的名稱縮寫和表示含量的縮寫。紙片直徑：藥敏紙片直徑應為：6.0mm～6.35mm

抑菌環直徑：用相應的質控菌進行紙片擴散法試驗，95%結果應符合該質控菌的可接受范圍。

（結果參照附表 A）

批內重復性：同批同型號的藥敏試紙其抑菌環直徑大值與小值之差≤2mm。

批間重復性：三批同型號的藥敏試紙，對同一質控菌進行抑菌試驗，同一平板上抑菌環大值和小值直徑之差的平均數不大于 4mm。

【注意事項】1冰箱內取出試紙瓶需放置恒溫后方可打開，防止冷熱水凝結使紙片受潮。

2藥敏試驗采用水解酪蛋白（MH）瓊脂，4mm厚度，PH7.2~7.4；對營養要求

高的細菌需另補充微量因子。建議挑取3~5個菌落調制菌液。

3平皿使用時應盡可能除去多余的水份，以免影響抑菌環的擴散。

4培養溫度應控制在35~37°C，堆放平皿不易過高影響受熱均勻。

5測量抑菌環應該仔細，。

6使用后的所有培養物須高壓滅菌處理。

【參考文獻】<<全國臨床檢驗操作規程>> 及CLSI<<抗菌藥物敏感性試驗執行標準>>2013版

科研實驗，不用于臨床診斷

附表:微生物藥敏紙片（擴散法<K-B 法>）的組成、代號/含量、抑菌環解釋標準、質控菌抑菌環允許范圍

編號	組成	代號/含量 <μ g>	抑菌環解釋標準	質控菌抑菌環允許范圍
編號	組成	代號/含量 <μ g>	R I S	大腸艾希菌 ATCC25922	ATCC25923	銅綠假單胞菌 ATCC27853	大腸艾希菌 ATCC35218
1		CTX30	≤14 15～22 ≥23	29～35	25～31	18～22	—
2		CRO30	≤13 14～20 ≥21	29～35	22～28	17～23	—
3		CFP75	≤15 16～20 ≥21	28～34	24～33	23～29	—
4		CAZ30	≤14 15～17 ≥18	25～32	16～20	22～29	—
5		CXM30	≤14 15～17 ≥18	20～26	27～35	—	—
6		CZ30	≤14 15～17 ≥18	21～27	29～35	—	—
7		CFX30	≤14 15～17 ≥18	23～29	23～29	—	—
8	頭孢吡肟	FEP30	≤14 15～17 ≥18	31～37	23～29	24～30	—
9		PIP100	假單胞菌屬 ≤17 ≥18	24～30	—	25～33	12～18
9		PIP100	其他G-桿菌 ≤17 18～20 ≥21	24～30	—	25～33	12～18
10	苯唑西林	OX1	金葡/里昂球菌 ≤10 11～12 ≥13	—	18～24	—	—
10	苯唑西林	OX1	凝固酶-葡萄球菌 ≤17 ≥18	—	18～24	—	—
11		AM10	腸桿菌 ≤13 14～16 ≥17	16～22	27～35	—	6
			葡萄球菌 ≤28 ≥29
			腸球菌 ≤16 ≥17
12		CB100	假單胞菌屬 ≤13 14～16 ≥17	23～29	—	18～24	—
12		CB100	其他G-桿菌 ≤19 20～22 ≥23	23～29	—	18～24	—
13		TIC75	假單胞菌屬 ≤14 ≥15	24～30	—	21～27	6
13		TIC75	其他G-桿菌 ≤14 15～19 ≥20	24～30	—	21～27	6
14	左氟沙星	LVF5	≤13 14～16 ≥17	29～37	25～30	19～26	—
15		CIP5	≤15 16～20 ≥21	30～40	22～30	25～33	—
16		OFL5	≤12 13～15 ≥16	29～33	24～28	17～21	—
17		LMF10	≤18 19～21 ≥22	27～33	23～29	22～28	—
18		GTF5	≤14 15～17 ≥18	30～37	27～33	20～28	—
19		FLE5	≤15 16～18 ≥19	28～34	21～27	12～20	—
20		0	≤12 13～16 ≥17	28～35	17～28	22～29	—
21		GM10	≤12 13～14 ≥15	19～26	19～27	16～21	—
22		SPF5	≤15 16～18 ≥19	30～38	27～33	21～29	—
23		DOX30	≤12 13～15 ≥16	18～24	23～29	—	—
24	米諾環素	MNO30	≤14 15～18 ≥19	19～25	25～30	—	—
25		CLA15	≤13 14～17 ≥18	—	26～32	—	—
26		VA30	若≤14 需測 MIC≥15	—	17～21	—	—
27		AZI15	≤13 14～17 ≥18	—	21～26	—	—
28		K30	≤13 14～17 ≥18	17～25	19～26	—	—
29		CM2	≤14 15～20 ≥21	—	24～30	—	—
30		E15	≤13 14～22 ≥23	—	22～30	—	—
31		P10U	葡萄球菌 ≤28 ≥29	—	26～37	—	—
31		P10U	腸球菌 ≤14 ≥15	—	26～37	—	—
32		C30	≤12 13～17 ≥18	21～27	19～26	—	—
注：1 編號 39 /棒酸比抑菌環直徑≥5mm 和/或編號 40 /棒酸比抑菌環直徑≥3mm，判定為產 ESBLs 。 2編號 56 用于鑒別葡萄球菌屬，抑菌環在 15～25mm 提示。 3編號 57 新生霉素用于葡萄菌屬內鑒定，ATCC25923 做陰性對照（≥16mm 敏感），抑菌環≤16mm為陽性（耐藥）和表皮葡萄球菌可被抑制，表現為敏感，而腐生葡萄球菌則表現為耐藥。 4編號 58 用于鏈球菌屬內鑒定形成抑菌環為敏感，則推斷被檢菌為A 群鏈球菌。 5編號 59 奧撲托新用于鏈球菌屬內鑒定抑菌環＞14mm 為敏感，推斷為肺炎鏈球菌。 6編號 60 質控允許范圍用糞腸球菌ATCC29212，抑菌環 16～23mm 為合格。

編號	組成	代號/含量 <μ g>	抑菌環解釋標準				質控菌抑菌環允許范圍
編號	組成	代號/含量 <μ g>	R	I	S		大腸艾希菌 ATCC25922	ATCC25923		銅綠假單胞菌 ATCC27853	大腸艾希菌 ATCC35218
33		FOS200	≤12	13～15	≥16		22～30	25～33		—	—
34		S10	≤11	12～14	≥15		12～20	14～22		—	—
35	四環素	TC30	≤14	15～18	≥19		18～25	24～30		—	—
36		RA5	≤16	17～19	≥20		8～10	26～34		—	—
37	/ 棒酸	AMC20/10	≤19	葡萄球菌	≥20		18～24	28～36		—	17～22
37	/ 棒酸	AMC20/10	≤13	其他 14～17	≥18		18～24	28～36		—	17～22
38	/ 棒酸	TCA75/10	≤14	假單胞菌	≥15		24～30	29～37		20～28	21～25
			其他G-桿菌 ≤14 15～19 ≥20
			≤22	葡萄球菌	≥23
39	/ 棒酸	CAC 30/10	—				25～32	16～20		22～29	—
40	/ 棒酸	CTC30/10	—				29～35	25～31		18～22	—
41	/ 舒巴坦	SCF75/30	≤15	16～20	≥21		28～34	24～33		23～29	—
42	/ 舒巴坦	AMS10/10	≤11	12～14	≥15		19～24	29～37		—	13～19
43	/	PIT100/10	≤17	假單胞菌	≥18		24～30	27～36		25～33	24～30
			其他G-桿菌 ≤17 18～20 ≥21
			≤17	葡萄球菌	≥18
44	/ 磺胺甲惡唑	SXT25	≤10	11～15	≥16		23～29	24～32		—	—
45	丁胺卡那	AN30	≤14	15～16	≥17		19～26	20～26		18～26	—
46		FT300	≤14	15～16	≥17		20～25	18～22		—	—
47		AZT30	≤15	16～21	≥22		28～36	—		23～29	—
48		IPN10	≤13	14～15	≥16		26～32	—		20～28	—
49		MPN10	≤13	14～15	≥16		28～34	29～37		27～33	—
50		TM10	≤12	13～14	≥15		18～26	19～29		19～25	—
51	奈替米星	NET30	≤12	13～14	≥15		22～30	22～31		17～23	—
52		CTZ30	≤14	15～19	≥20		30～36	27～35		12～17	—
53	頭	CF30	≤14	15～17	≥18		15～21	29～37		—	—
54	替拉寧	TCL30	≤10	11～13	≥14		—	15～21		—	—
55		TMP5	≤10	11～15	≥16		21～28	19～26		—	—
56		FZ100	—				—	15～25		—	—
57	新生霉素	NB5	—				—	≥16		—	—
58		B0.04				化膿性鏈球菌 ATCC19615			形成抑菌環
59	奧撲托新	EPR5	肺炎鏈球菌 ATCC49619 抑菌環＞14mm
60		GM120	糞腸球菌 ATCC29212 抑菌環：16～23mm

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