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PCR技術總論2016/1/4
多聚酶鏈式反應(polymerasechainreaction)簡稱PCR技術,是80年代中期發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術。此法操作簡便,可在短時間內在試管中獲得數百萬個特異的目的DNA...
巢式PCR與序列分析方法在確定HBV傳播途徑中的應用2015/12/29
1材料與方法1.1研究對象從1995年3月至1996年3月在湖南省某縣以HBsAg為指標篩檢前來終止妊娠的孕婦及其配偶。選擇8名男性HBV攜帶者與其子宮內受染有胎兒為研究對象。攜帶者以elisa檢測常...
動物組織中DNA的制備2015/12/24
(一)原理DNA是所有生物體的基本組成物質。真核生物DNA主要存在于細胞核中。制備DNA時應將細胞核膜打破方能釋放出來。細胞中的DNA和RNA分別與蛋白質相結合,形成脫氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在細胞...
DNA重組技術:連接2015/12/21
實驗原理:質粒具有穩定可靠和操作簡便的優點。如果要克隆較小的DNA片段(<10kb=且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的,先用限制性內切酶切割質粒DNA和...
差示反轉錄PCR[mRNA差異顯示技術]2015/12/16
mRNA差異顯示技術是由美國波斯頓Dena-Farber癌癥研究所的LiangPeng博士和ArthurPardee博士在1992年創立的[3]。它也稱為差示反轉錄PCR(differentialdi...
士鋒DNA定序分析2015/12/16
目的對于許多重組DNA的實驗,知道DNA的序列常是進一步操作所*的。本實驗將定出你所選殖之cDNA的序列,并進行數據庫比對分析。其目的在教導學生如何從事DNA定序分析及DNA序列的計算機分析。原理本實...
質粒DNA和RNA的理論含量2015/12/14
一.質粒dna含量質粒名稱質粒大小拷貝數DNA含量(每ml)PGEMPUCPBR3222,700bp2,700bp4400bp300-700500-700251.8-4.1μg2.9-4.1μg0.2...
生物安全和重組DNA技術2015/11/30
重組DNA技術涉及到組合不同來源的遺傳信息,從而創造自然界以前可能從未存在過的遺傳修飾生物體(geneticallymodifiedorganisms,GMOs)。zui初,在分子生物學家中有人擔心這...
堿變性法提取質粒DNA2015/11/23
【基本原理】普遍采用的堿變性法具有操作簡便、快速、得率高的優點。其主要原理是,利用染色體DNA與質粒dna的變性與復性的差異而達到分離目的。在堿變性條件下(pH12.6),染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺...
士鋒cDNA的合成2015/11/19
一原理逆轉錄PCR(RT-PCR)具有靈敏度高、專一性好、簡便快捷等優點,其不僅是定量檢測微量樣品和表達水平低的基因的一種有效方法,同時也是從真核生物中獲得目的基因的一條重要途徑。cDNA的合成是RT...
士鋒生物重組質粒的構建設計2015/11/17
基因工程又稱遺傳工程、DNA重組技術、分子克隆等。它是七十年代在分子生物學發展的基礎上形成的新學科。所謂基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遺傳物質,在體外切割,拼接和重新組...
士鋒動物肝臟DNA的提取2015/11/12
一、目的:了解分離提取DNA的一般原理,掌握從動物肝臟中提取DNA的方法。二、原理:在濃氯化鈉(1—2mol·L-1)溶液中,脫氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化鈉(0.14m...
士鋒生物DNA片段的純化回收2015/11/10
載體及目的DNA片斷經酶切后,如果無多余的片斷(如載體單切)可以直接酚/氯仿抽提后乙醇沉淀回收直接連接用。但多數還有多余片斷(如載體雙酶切后有插入片斷但要回收空載體,多個目的DNA片斷選擇其一克隆),...
mRNA差異顯示技術2015/11/3
1.概述mRNA差異顯示技術(mRNAdifferetialdisplay)是一種快速有效的克隆差異性表達基因的方法。方法建立:1992年LiangP和Pardee應用DD技術對比人類乳腺癌細胞與正常...
總RNA和基因組DNA同步純化試劑盒介紹2015/10/26
適合從動物細胞、動物組織或酵母菌中同步純化總RNA和基因組DNA純化的總RNA適合用于NorthernBlot、RT-PCR、體外翻譯、PrimerExtension、S1核酸酶作圖、RNase保護測...

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