T7Select 噬菌體展示系統

時間：2015/4/24閱讀：2388

T7Select? 噬菌體展示系統是Novagen開發的基于T7噬菌體(而非傳統的M13)創新的基因發現研究產品。目的序列(C-端)與T7基因10 衣殼蛋白而表達得到的多肽和蛋白即可暴露(展示)與病毒(T7噬菌體)的表面。復制周期短，細胞質蛋白組裝，操作和儲存方便，超高克隆效率，以及T7噬菌體強大的天然特性使Novagen的T7Select成為替代傳統M13系統的更好選擇，用于文庫構建和親和淘洗。由于T7噬菌體展示系統能構建和篩查更大的文庫，能使研究者更有可能發現“滄海一粟"的目標分子。

該系統以多種產品形式提供，包括T7Select噬菌體克隆試劑盒，包含OrientExpress? cDNA合成的試劑盒以及T7Select噬菌體克隆系統。

另有12種預制人正常組織和病理組織來源的cDNA文庫提供，這些文庫都是用T7Select10-3載體構建的。

T7噬菌體展示系統與M13系統有什么區別？

M13和T7噬菌體zui大的區別就在于成熟病毒從宿主細胞中釋放的方式不同。M13噬菌體在周質中組裝，必須經細胞膜分泌；而T7在細胞質中完成組裝后直接從細胞裂解出來。因此，任何抑制分泌過程的蛋白和多肽都不能在M13系統中展示，或展示效果很差。例如，具有帶電荷氨基酸殘端的疏水蛋白、肽或多肽等，會因穿膜困難而無法展示。T7文庫則不受這種序列限制，而且，一般來說T7展示系統表達蛋白或多肽的種類要比M13這樣的絲狀噬菌體更多。

T7比M13*主要還是表現在易于操作、表達能力以及親和淘洗富集等方面。T7雖然要求體外包裝但生長極為迅速。T7噬斑形成僅需3小時，比M13系統節約整整1天。M13則在測序方面比T7更方便。

T7噬菌體極為穩定，能在各種嚴酷的條件下不被破壞，而其它噬菌體常在親和淘洗的過程中失去活性。因此，在T7系統的結合/洗脫過程中，可選用的試劑種類較廣泛，親和淘洗后噬菌體仍然保持很高的感染活性。

產品應用

許多基于多肽或蛋白功能來獲得其編碼cDNA的研究多可以選用噬菌體展示技術，例如：

蛋白相互作用(例如激素，抗體，受體)

酶分析，酶抑制

核酸-蛋白相互作用

抗原決定簇作圖

突變分析

特點與優點

*的產品	是采用T7為載體的噬菌體展示系統，沒有市售同類產品。*
*的預制文庫	預制cDNA文庫是Novagen的親和掏洗產品，其它商業化親和掏洗文庫是多肽文庫而非cDNA文庫。*
操作方便	提供完備的cDNA合成、克隆、包裝、表達和親和掏洗的高質量試劑盒以及詳細的優化操作步驟指導。
大通量親和淘洗	T7極其穩定，在親和掏洗時可以采用各種試劑以將噬菌體從固相結合物上釋放下來，例如1% SDS，5 M NaCl，4 M尿素，2 M鹽酸胍，10 mM EDTA，100 mM DTT，pH 4-10。
高代表性文庫構建與展示	采用包裝提取物和T7克隆試劑盒能輕易地構建大的展示文庫。
有高、中、低拷貝表達供選擇	用戶可以根據表達和親和掏洗(蛋白結合)的具體要求方便地選擇相應的高拷貝或低拷貝表達載體: T7Select系統提供多種在T7表面以高、中、低拷貝表達蛋白的T7噬菌體載體。*拷貝數(415-1載體為415拷貝)載體適合用于小、低親合力的結合域。低拷貝數(1-1b和1-2a-c載體為0.1-1拷貝)載體適合用于分析高親和力結合域。新推出的中拷貝展示載體(10-3)可以中等拷貝數展示(5-15)，使T7Select系統也可以用于分析中等親和力的結合。
節省經費	試劑盒組成完整，價格合理(例如，T7Select OrientExpress Systems)，可以為用戶節省更多費用。
展示廣譜的蛋白及多肽	有可以展示多肽或多達1200氨基酸的蛋白的載體供選擇
對蛋白類型無限制 (與M13不同)	可表達的蛋白的種類比M13系統更多。T7展示的蛋白(或多肽)輸出無需經過分泌途徑。像b-gal等之所以不能用M13這樣的絲狀噬菌體展示原因正在于此。序列非依賴型。
毒性蛋白問題	可選擇高拷貝或低拷貝表達
快速	T7 生長快，節約克隆和篩查時間，3小時內即可形成噬斑。
完整的文庫	包裝效率高，文庫代表性好。
更強大的蛋白展示功能	蛋白通過C-端融合表達而不是通常的N-端融合。插入片段被克隆到T7Select載體基因10 的C-端，因此，即使插入片段內含有終止密碼子也可以被表達和展示。這在必須在N-端克隆的M13是無法進行的。N-端融合克隆cDNA時常會造成麻煩，因為poly(A)區( cDNA中為oligo d(T))常位于翻譯終止密碼子的下游。

日韩午夜在线观看,色偷偷伊人,免费一级毛片不卡不收费,日韩午夜在线视频不卡片

T7Select 噬菌體展示系統

會員登錄

收藏該商鋪

提示