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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

重組大腸桿菌目的蛋白的表達(dá)-蛋白電泳

時間:2015/3/27閱讀:724
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二、實驗安排

第1次   菌體超聲破壁、離心、包涵體復(fù)性、 裝離子交換柱

第2次   測酶活、定蛋白離子交換層析  層析樣品進(jìn)行濃縮、透析 

第3次    濃縮、透析前、后樣品測活、定蛋白  裝分子篩柱   

第4次    分子篩層析,并對收集樣品進(jìn)行測活、定蛋白等 

第5次    對分離純化各樣品進(jìn)行蛋白電泳分析,并繪出分離純化表 


三、實驗操作    

第1次:  菌體超聲破壁、離心、包涵體復(fù)性、裝離子交換柱  

實驗順序:超聲破壁→離心→裝離子交換柱→平衡→包涵體復(fù)性  

掌握要點:破壁原理 

裝離子交換柱方法  


  

包涵體復(fù)性原理及方法

第2 次:測酶活、定蛋白、  離子交換層析分析 、 層析樣品進(jìn)行濃縮、透析 

實驗順序:測酶活→上柱→梯度洗脫→定蛋白→紫外吸收測蛋白峰→酶活曲線測定→收集樣品→ 濃縮 →透析 涉及單元實驗:測酶活、定蛋白、  離子交換層析、濃縮、透析  

掌握要點:堿性磷酸單酯酶測活原理 

          紫外吸收法繪蛋白濃度曲線方法 

          離子交換層析原理及方法 

          濃縮及透析常用方法

第3次:濃縮、透析前、后樣品測活、定蛋白、裝分子篩柱  

實驗順序:濃縮透析前、后樣品測活→考馬斯亮藍(lán)法定蛋白→裝分子篩柱→平衡  

涉及單元實驗:測活、定蛋白、裝分子篩柱  

掌握要點:考馬斯亮藍(lán)法測蛋白濃度方法  

                  裝分子篩柱方法 

第4次:分子篩層析,并對收集樣品進(jìn)行分析  

實驗順序:測活樣品進(jìn)行分子篩層析→紫外吸收測蛋白峰--酶活曲線測定→考馬斯亮藍(lán)法定蛋白  

涉及單元實驗:破壁、離心、分子篩層析、復(fù)性 

掌握要點:分子篩層析原理  

                  對分離純化各樣品計算比活

第5次:對分離純化各樣品進(jìn)行蛋白電泳分析, 并繪出分離純化表 

 實驗順序:蛋白電泳,同時進(jìn)行數(shù)據(jù)分析 

涉及單元實驗:蛋白電泳

掌握要點:掌握蛋白電泳方法 

                  了解分離純化樣品純度鑒定的各種方法 

                  繪制酶的分離純化表 

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