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細胞凝集反應的實驗原理和方法

時間:2014/11/28閱讀:876
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實驗原理

細胞膜是雙層脂鑲嵌蛋白質結構,脂和蛋白質又能與糖分子結合為細胞表面的分枝狀糖外被。目前認為:細胞間的,細胞的生長和分化,免疫反應和腫瘤發生都和細胞表面的分枝狀糖分子有關。

 凝集素(lectin)是一類含糖的(少數例外)并能與糖等專一性結合的蛋白質,它具有凝集細胞刺激細胞分裂的作用。凝集素使細胞凝集是由于它與細胞表面的糖分子連接,在細胞間形成橋的結果,加入與凝集素互補的糖可以抑制細胞的凝集。

實驗用品 

  1、土豆塊莖。
  2、顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管2支、離心管2支。
  3、PBS緩沖液
  稱取NaC 17.2g、Na2HP04 1.48g、KH2PO40.43g、加蒸餾水,定容至1000ml調pH值到7.2。
  4、2%的紅細胞。

以無菌方法抽取兔子靜脈血液(加抗凝劑),用生理鹽水洗5次,每次2000r/min,離心5min,zui后按壓積紅細胞體積用生理鹽水配成2%紅細胞液。

實驗方法

稱取土豆去皮塊莖2g,加10ml PBS緩液,漫泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集索。

用滴管吸取土豆凝集素和2%紅細胞液各一滴,置載玻片上,充分混勻,靜置20min后于低倍顯微鏡下觀察血球凝集現象。

以PBS液加2%血細胞液作對照實驗。

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