帶電粒子在電場中向著與其自身帶相反電荷的電極移動(dòng)的現(xiàn)象，稱為電泳。控制電泳條件（如pH 等），使混合試樣中的不同組分帶有不同的凈電荷，各組分在電場中移動(dòng)的速度或方向各不相同，從而達(dá)到分離各組分的目的，這就是電泳分析法。以醋酸纖維素薄膜作支持物進(jìn)行電泳分析的方法稱為醋酸纖維素薄膜電泳法。
在pH4.8 電泳緩沖液條件下，帶有不同量磷酸基團(tuán)的AMP、ADP、ATP 解離之后，帶有負(fù)電荷量的順序?yàn)椋篈TP＞ADP＞AMP，它們在電場中移動(dòng)速度不同，從而得到分離。又利用核苷酸類物質(zhì)的堿基具有紫外吸收性質(zhì)，將分離后的電泳醋酸薄膜放在紫外燈下，可見暗紅色斑點(diǎn)，參照標(biāo)準(zhǔn)樣品在同樣條件下的電泳情況，對混合試樣分離后的各組分進(jìn)行鑒定。

三、儀器與試劑
1．儀器
（1）電泳儀、電泳槽（平板式）
（2）紫外燈
（3）電吹風(fēng)、醫(yī)用鑷子
（4）醋酸纖維素薄膜（8 cm×12cm）
（5）微量進(jìn)樣器（10μL 或50μL）
2．試劑
（1）檸檬酸緩沖液（pH4.8）：稱取檸檬酸8.4g，檸檬酸鈉17.6g，溶于蒸餾水，稀釋到2000mL。
（2）標(biāo)準(zhǔn)腺苷酸溶液：用蒸餾水將純AMP、ADP、atp 分別配成100mg/10mL 溶液。其中AMP 需略加熱助溶。置冰箱備用。
（3）混合腺苷酸溶液：分別取上述標(biāo)準(zhǔn)液AMP、ADP、ATP 各1 份等量混勻。置冰箱備用。

四、操作步驟
1．點(diǎn)樣：將醋酸纖維素薄膜放入pH4.8 檸檬酸緩沖液中，待膜*浸透（約0.5h）后用鑷子取出，夾在清潔的濾紙中間，輕輕吸去多余的緩沖液，仔細(xì)辨認(rèn)薄膜無光澤面，用微量進(jìn)樣器在無光澤面上點(diǎn)樣。點(diǎn)樣點(diǎn)距薄膜一端1.5cm，樣點(diǎn)之間距離1.5cm。點(diǎn)樣量為2～3μL，按少量多次原則分2~3 次點(diǎn)完。
2．電泳：向兩個(gè)電泳槽內(nèi)注入pH4.8 的檸檬酸緩沖液，緩沖液的高度約為電泳槽深度的3/4。（注意：兩槽中電泳液面一致）。用寬度與薄膜相同的濾紙作“濾紙橋”連接醋酸纖維素薄膜和兩極緩沖液。待濾紙全部被緩沖液浸濕后，將已點(diǎn)樣薄膜的無光澤面向下貼在電泳槽支架的“濾紙橋”上。
點(diǎn)樣端置于負(fù)極方向，蓋上電泳槽蓋，接通電源，在電壓降為10V/cm 的條件下進(jìn)行電泳，一小時(shí)后關(guān)閉電源，取出醋酸纖維素薄膜，用電吹風(fēng)吹干。
3．鑒定：用鑷子小心地將吹干的薄膜放在紫外燈下觀察，用鉛筆劃出各腺苷酸電泳斑點(diǎn)，并標(biāo)明各斑點(diǎn)的腺苷酸代號(hào)。
繪出三種標(biāo)準(zhǔn)核苷酸及樣品的電泳圖譜，以標(biāo)準(zhǔn)單核苷酸的遷移率作標(biāo)準(zhǔn)，鑒別試樣中各組分。

五、附 注
1．電泳前，一定要檢查電極正負(fù)極與薄膜方向，確定負(fù)極接在薄膜的點(diǎn)樣一端，因?yàn)闃悠肥菐ж?fù)電荷，接通電源后，樣品要在薄膜上向正極泳動(dòng)；確定薄膜的無光澤面朝下。
2．點(diǎn)樣時(shí)，要控制點(diǎn)樣點(diǎn)的大小在直徑為2~3mm，樣點(diǎn)不可太大，否則電泳后觀察結(jié)果不理想