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士鋒生物免疫酶細胞化學

時間:2013/12/19閱讀:583
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免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中zui常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色后,于光鏡或電子顯微鏡下觀察分析的形態學研究方法。
40多年前,Coons及其同事利用熒光色素(fitC)標記抗體而開創的免疫熒光抗體技術,具有一定的靈敏性、特異性、操作簡單等優點,但亦存在抗體用量大,標本不能保存、需較昂貴的熒光顯微鏡等問題。幾乎在同一時期,電子顯微鏡在醫學生物學領域中得到了廣泛的應用。為克服熒光抗體法的不足、并能在超微結構水平定位抗原物質的存在部位,Nakane(1966)等成功地引入了酶代替熒光色素標記抗體,進行組織細胞內抗原或半抗原的定位,開辟了酶標抗體技術免疫酶細胞化學之路。
Sternberger(1970)等人在此基礎上又作了改良,建立了非標記抗體酶法以及PAP法。酶標抗體法確立至今已經27個春秋,不斷發展、成熟。各種新技術的引入,使新抗體相繼問世,應運而生的抗體制造、經銷商遍布世界各地,使ICC技術得到了更廣泛的推廣和應用,成為當今形態學研究領域中*的手段;同時也有為臨床病理診斷、腫瘤性質的判定、預后的估測等提供重要依據,是臨床實驗室常規檢查法之一。近年,伴隨分子生物學、分子遺傳學的驚人進步,ICC技術在基因表達產物的觀察,細胞功能動態分析中,亦發揮著重要作用。在此,結合,筆者經驗,介紹ICC染色中的主要程序:組織標本的固定、切片、染色原理及步驟、結果判定及一些進展、特殊應用等供讀者參考。

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