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士鋒生物的細胞培養基的實驗步驟和注意事項

時間:2013/10/22閱讀:582
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細胞培養基的基本要求

1.營養成分

氨基酸、單糖、維生素、無機離子與微量元素。

2.促生長因子及激素

3.滲透壓

4.pH

5.無毒、無污染

七、細胞培養基組成及作用

1.氨基酸

組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少時,細胞生長不良而死亡。

必需氨基酸包括L-、L-、L-異、L-、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯、L-、L-、L-等。

2.維生素

維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節及控制作用。在細胞培養中,盡管血清是維生素重要來源, 但是許多培養基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。

如:A、D、E、K。

如:B1、B2、B6、B12、泛酸、、、C、等。

許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。

VA是細胞合成糖蛋白時寡糖基的載體,對上皮細胞有重要的維護作用。VD參與調節鈣的吸收。VE是抗氧劑,可防止組成生物膜的磷脂中不飽和脂肪酸被氧化。VK缺乏會引起低原及凝血時間延長。

是合成四氫的重要原料,四氫在核酸的生物合成和蛋白質的生物合成過程中起重要作用。

是一些特異羧化酶的組成部分,參與糖代謝和脂肪酸的合成過程。

3.碳水化合物

碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

4.無機離子

鈉、鉀、鎂、鈣、磷等基本的無機離子,這些都是細胞組成所必須并參與細胞的代謝。

培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節細胞膜功能。培養液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通常可耐受260mOsm/kg −320 mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意:向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質。

Na+是細胞外液中zui主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K +主要分布在細胞內液,細胞內K +的對于激活某些酶是必需的,它在調節細胞內環境的酸堿平衡也有極重要意義。 Ca2+ 在細胞外液中的作用是將組織內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。 Mg2+ 是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控的功用是十分廣泛而*。

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