血管緊張素原抗體

抗原準(zhǔn)備

抗原，是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生（特異性）免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)（特異性反應(yīng)）的物質(zhì)。抗原的基本特性有兩種，一是誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力，也就是免疫原性，二是與免疫應(yīng)答的產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)，也就是抗原性。

很多物質(zhì)都可以成為抗原，抗原的具體分類可以參見抗原，在進(jìn)行單克隆抗體制備過程中，很多物質(zhì)都可以成為抗原，在常規(guī)的科研實(shí)驗(yàn)中，科研者經(jīng)常選用每只小鼠/大鼠每次注射10~50ug 重組蛋白、偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)小分子等作為抗原產(chǎn)生特異性的單克隆抗體。

動(dòng)物免疫

單克隆抗體制備的宿主動(dòng)物一般選用Balb/c小鼠，鼠單抗的應(yīng)用范圍相當(dāng)廣泛，也有一些公司聲稱開發(fā)出了兔的單克隆抗體制備技術(shù)。

免疫原分為可溶性抗原和顆粒性（細(xì)胞）抗原，用無菌鹽水稀釋并與佐劑混合，腹腔注射抗原與佐劑*混勻后形成的穩(wěn)定乳狀液，在免疫原提供持續(xù)的免疫應(yīng)答基礎(chǔ)上進(jìn)行加強(qiáng)免疫血管緊張素原抗體

周期 第1天 采血0.2ml（獲得0.1ml免疫前血清）

*次免疫（抗原加弗氏*佐劑）

第14天 第二次免疫（抗原加弗氏不*佐劑）

第21天 采血和ELISA檢測(cè)

第35天 第三次免疫（抗原加弗氏不*佐劑）

第42天 采血和ELISA檢測(cè)

第56天 第四次免疫（抗原溶于PBS或鹽水）

第61天 細(xì)胞融合

免疫動(dòng)物 免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠，按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官，刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。
  2、細(xì)胞融合 采用眼球摘除放血法處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內(nèi)擠壓研磨，制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞。