活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體說明書

操作方法
1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，調(diào)pH至7.0，室溫攪拌1h，離心去沉淀。
2．于上清液中加入等量的飽和硫酸銨溶液，混勻后靜置30min或冰箱過夜。
3．10 000r/min離心10min，去上清。
4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。
5．生理鹽水中透析除鹽。
6．過DE52柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脫蛋白（IgG）棄去。
7．換用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脫，收集蛋白峰，即為IgA。
8．再過SephadexG200柱，洗液為0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脫液測OD280值，取*峰即為純化IgA。
9．透析、濃縮、鑒定。

活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體說明書分泌型IgA的分離與鑒定
（一）材料與試劑
1．初乳
2．SephadexG200
3．0.10Mol/L pH6.8PB液
4．0.01Mol/L pH7.4PB液
5．DEAE52

操作方法
1．取初乳20ml，10 000rpm離心10min，棄去表面脂肪層及底部的沉淀物。
2．取乳清過SephadexG200柱（柱規(guī)格為2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脫，*峰為IgA（含IgG）。
3．        收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
4．        將透析液濃縮至5mg/ml以上。
5．        過DE52層析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脫，洗下蛋白峰為IgG，棄去。
6．        換用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脫，
收集洗脫液 ，即為較純的IgA液。
7．        必要時，可再過一次SephadexG200柱。
8．        濃縮，鑒定