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下面我們來介紹下ELISA試劑盒的標本及采集、貯運因素:
1、嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性
2、混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈;如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應;
3、標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;
4、采血試管洗滌不*、反復使用易交叉污染;
5、塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。
還有關于說明重點注意:
1、血清標本宜在新鮮時檢測,嚴重溶血標本禁用。
2、反復凍融會使 抗體 效價跌落,所以測 抗體 的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管*。并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷能吸附酶標記物不易洗脫有關。
3、EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。
4、血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的*或于*中加入適當的促凝劑。
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