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283次蛋白質含量使用數據分析
由于大多數蛋白質檢測,樣品蛋白濃度測定,通過比較分析的稀釋系列標準,其濃度是已知的。蛋白質樣品和標準的處理中相同的方式,通過將它們與測定試劑和使用分光光度計測量的吸光度的響應的標準用于繪制或計算出標準曲線。未知樣品的吸光率值,然后插值到的標準曲線,以確定它們的濃度的情節或公式。
這是概念上的簡單和直接的比較方法確定為“未知”的濃度。然而,其在檢測中協議的執行是復雜的移液和稀釋步驟,評價復制,空白校正和其他因素。這些步驟方面是必要的計算,以獲得zui終的決定,經常會引起混淆。
原則的標準曲線分析
1.相同的檢測樣品直接比較:
樣品測??定的反應直接彼此相媲美的是當它們存在在*相同的方式處理。的蛋白質的量的變化是在zui后的吸光度的差異(顏色強度)如果所有三個后續條件遇見的*可能的原因:
樣品溶解在相同的緩沖液中
同樣的地段和股票用于所有樣品的檢測試劑
所有的樣品混合,并在相同的時間和溫度的保溫
無移液錯誤
當然,不同的蛋白質,因為不同的化學成分中的蛋白質測定方法,將產生不同的吸光率值,即使在相同的濃度。這被稱為“蛋白 - 蛋白變異”或“蛋白質的均勻性”,并更充分地討論的其他蛋白的方法的文章中。
2.單位等于單位:
用于表達的標準的計量單位是由相同的單元,將在相同的度量單位表示與未知樣品的計算值(即,zui終的查詢結果未知樣品的計量,用于標準定義) 。例如,如果標準的被表示為每毫升微克(微克/毫升),然后為未知的樣品,這是通過比較標準曲線,確定的值也表示為微克每毫升。
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