平時(shí)在實(shí)驗(yàn)室zui常聽到的一句話就是“今天某某試驗(yàn)沒做好是為什么？今天某某試驗(yàn)沒出結(jié)果是什么原因？今天某某試驗(yàn)為什么會(huì)是這樣的呢？” 等等。然后仔細(xì)一查找原因，往往是由于操作上面的不認(rèn)真，或是一些小小的細(xì)節(jié)沒有注意到。以下是集各路朋友的一些經(jīng)驗(yàn)，與大家分享：
1跑page膠的時(shí)候，小電壓跑會(huì)避免高電壓產(chǎn)生的熱量爾導(dǎo)致的膠層變形。低電壓泳道會(huì)比大電壓泳道跑的直一些，且分離效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分離。
2. 提取質(zhì)粒的時(shí)候，zui后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵，基本上是其后續(xù)的酶切反應(yīng)的決定性因素。所以這一步盡量揮發(fā)長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間，是空調(diào)吹熱風(fēng)，或是37度溫箱放長(zhǎng)一點(diǎn)的時(shí)間，我試過室溫過夜，酶切很好。
3. 做WESTERN BLOT 的時(shí)候，大家往往會(huì)摸索一抗、二抗的濃度，封閉時(shí)間，曝光時(shí)間等等，而每次變換其中的一個(gè)條件就需要從新跑膠、轉(zhuǎn)膜，甚至重新提蛋白，這樣會(huì)浪費(fèi)大量的時(shí)間。其實(shí)*沒有必要這樣。一次轉(zhuǎn)膜后，將PVDF膜晾干，裁減成小塊，保存起來，用的時(shí)候取出一塊，沒有任何影響。這對(duì)于摸索條件的戰(zhàn)友來說，節(jié)約了大量的時(shí)間。
4. 有關(guān)緩沖液和培養(yǎng)基配置
1）將緩沖液配方中的成分分別以10－100倍配成母液儲(chǔ)存，需要的時(shí)候只需將相應(yīng)的母液混合，補(bǔ)加水稀釋即可
2）配培養(yǎng)基時(shí)通常會(huì)忘記各成分的量，如配LB時(shí)的三個(gè)成分不記得到底哪個(gè)是5g，哪個(gè)要10個(gè)，因此可以在常用的試劑瓶的標(biāo)簽上注明所需的量，如配LB時(shí)，在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等，很方便，不需要每次配之前臨時(shí)翻書
還給大家推薦一個(gè)省質(zhì)粒試劑盒硅膠柱與溶液的方法：
所有試劑使用手提質(zhì)粒自己配置的溶液一、溶液二、溶液三（代替試劑盒的solution1、2、3），然后一比一的與飽和*或*（代替結(jié)合緩沖液）混合，就可以讓質(zhì)粒在硅膠上結(jié)合，而試劑盒的硅膠柱可以重復(fù)使用，沒有試劑盒溶液量的限制，只要是一樣的質(zhì)粒我想提幾管就提多少。
順便說一句硅膠柱也可以用自己買的硅膠粉末代替，離心后倒掉硅膠柱上面的上清就可以，用起來不象柱子方便。效果比手提的要好要快。