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新城疫實驗室診斷
點擊次數:369 發布時間:2012-5-3
對于該病的實驗室診斷,傳統的方法是進行病毒分離,然后用血凝和血凝抑制進行鑒定。盡管NDV只有一種血清型,但是不同毒株間的毒力差異很大。加上近年來新城疫弱毒活疫苗的廣泛應用,僅從具有臨床癥狀的病禽分離出病毒進行鑒定,還不能對ND作出確診,因此需要對分離株的致病性進行評估,OIE根據*的病原毒力與病原分子結構間的關系建立的體外毒力鑒定技術,已經用于世界范圍內新城疫病毒的調查。世界動物衛生組織(OIE)對報告ND暴發作丁下述定義:ND是由血清1型禽副黏病毒(APMV-1)引起的禽類感染,該APMV—1在毒力上符合下列兩個標準中的一個:
①該病毒在1日齡雛雞的腦內接種致病指數(1CPl)大于0.7;
②該病毒P1蛋白的N端(即117位殘基)為苯*(F),而F2蛋白的C端有多個堿性氨基酸(直接測序或從核苷酸序列推導)。所謂多個堿性氨基酸是指在113位和116位之間至少有3個*或賴氨酸殘基。不能顯示上述氨基酸殘基的特征結構則需要對分離的病毒作ICPl試驗。
根據OIE對NDV的這一定義,目前OIE確診ND有兩種方法:
一是分離鑒定NDV并進行生物學試驗,測定分離NDV的MDT、ICPt和IVPI以確定其毒力;
二是采用基于RT-PCR的分子生物學方法,確定病原為NDV并確定其毒力。
因常規的病毒分離鑒定和用生物學試驗確定毒力費時、費力、費錢,又要使用動物,已越來越不被人們所接受。在這種情況下,經過幾年探索而日趨成熟的分子確診方法,可以用來取代常規的確診方法。近年來,隨著分子生物學和免疫學技術的快速發展,越來越多的快速診斷方法在新城疫的檢測方面得到廣泛的應用,如RT-PCR技術、熒光RT-PCR技術、EIASA技術和膠體金標記的診斷技術等。