當前位置:北京遠月貿易有限公司>>技術文章>>對PCR實驗室的一點思考壓差是怎么回事?
可以說,疫情促進了PCR實驗室的標準化建設,同時也大力推廣和應用了PCR實驗室。除了建筑布局符合要求外,PCR實驗室的壓差也是保證安全的重要環節。
聚合酶鏈反應實驗室的功能用房包括試劑配制室、樣品處理室、核酸擴增室和產品分析室(也可以擴增和分析同為一個房間)。每個房間在物理空間上必須*獨立,在使用中必須始終處于*分離的狀態,不能有空氣直接連接。所以每個房間都會有一個緩沖室,用來保持主操作室的壓差,隔離每個房間的空氣。
聚合酶鏈反應實驗室又稱基因擴增實驗室,是聚合酶鏈反應(PolymeraseChainReaction)的大特定的脫氧核糖核酸片段,可視為生物體外的特殊脫氧核糖核酸復制。通過脫氧核糖核酸基因跟蹤系統,可以快速掌握患者體內的病毒含量,其準確性高達納米水平,準確檢測乙肝病毒在患者體內的數量、復制性、感染性、感染性、需要服藥、肝功能異常變化,可以及時判斷患者使用哪種抗病物,判斷藥物的療效,為臨床治療提供可靠的檢驗依據。
PCR實驗室各功能區的功能。
試劑室(一區):儲存試劑的制備、試劑的分裝和擴展反應混合液的準備、離心管、吸頭等消耗品的儲存和準備。
樣品處理室(二區):核酸(RNA、DNA)的提取、儲存和添加到擴增反應管中。臨床樣品操作應符合生物安全二級實驗室保護設備、個人保護和操作規范的要求。
核酸擴展室(三區):cDNA合成、DNA擴展和檢測。
產品分析室(四區):擴展片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、序列測定等。
一般來說,房間的壓差有正壓和負壓兩種,房間維持正壓主要是為了防止外部污染源的侵入,氣流的方向是從內到外,房間維持負壓主要是為了防止內部污染源的擴散,氣流的方向是從外到內。
在GB50881-2013年《疾病預防控制中心建筑技術規范》中,對PCR實驗室功能用房環境設計參數提出了以下要求:
單向流動。
-表示沒有要求。
原則上,防止污染源的所有房間都應設置為正壓,以避免外部污染源的侵入。例如,傳統的無菌檢測室和超凈工作臺應遵循正壓原則。產生污染源的所有房間都應設置為負壓,以防止內部污染源的傳播。例如,特殊的生物安全實驗室和聚合酶鏈反應擴展室應設置為負壓。通風柜和生物安全柜遵循負壓原則。
集中配置的PCR實驗室:
試劑準備的主操作室和緩沖室設置為正壓,
樣品處理的主要操作室和緩沖室設置為微負壓。
核酸擴散和產物分析的主要操作室和緩沖室設置為負壓,以防止擴散和電泳操作過程中產生的氣溶膠在開門過程中擴散到走廊,然后擴散到試劑準備室和樣品處理室,導致假陽性結果。
樣品處理雖然是污染操作,但在生物安全柜中進行。生物安全柜的功能主要是去除感染性氣溶膠,保護實驗樣品、操作人員和實驗室環境,避免操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和飛濺物。
聚合酶鏈反應實驗室的試劑配制室、樣品處理室、核酸擴增室和產品分析室不應共用空調回風系統。核酸擴增室和產品分析室的鄰居也應保持相對微負壓差。
組合PCR實驗室的空調負荷、通風次數等原則上與BSL-2生物安全實驗室一致。PCR實驗室需要在暖通系統中設置獨立的新風空調系統,PCR實驗室沒有空氣凈化的強制要求,只需設置初效和中效空氣過濾器即可。
方案1:
不同房間的排氣應設置止回裝置,排氣扇吸入側應設置活性炭等生物凈化裝置,標本制備區的整個排氣柜應設置專用排氣扇。實驗室的排氣和送風形成了定送變排的控制邏輯,生安柜的排氣和補氣采用了單獨的系統。暖通空調系統的壓力梯度控制原理如下圖所示。
聚合酶鏈反應實驗室的氣流組織應采用上送下排,送風口和排風口的布置應將室內氣流停滯的空間降至。同時,不得在生物安全柜操作面或其他氣溶膠操作場所的上方附近設置送風口。
方案2:
除了使用專用的補風機組來平衡生安柜的排氣外,還可以采用另一種方案,即增加樣品制備間平時輸送的新風量,保持不變,以滿足生安柜打開時的風量平衡要求。除了保持壓力梯度的排氣口外,還增加了與生安柜連鎖的排氣口。生安柜排氣機組設定風量運行。暖通空調系統的壓力梯度控制原理如下圖所示。
生安柜打開時,連鎖排氣口關閉,生安柜關閉時,連鎖排氣口打開。室內另一排氣口根據相鄰房間的壓力梯度改變風量,與送風形成定送變排的控制邏輯。
該方案節約了補氣專用空調機組,節約了機械室的使用面積,相對降低了初步投資成本,但對自控系統的要求很高,而且生安箱不運轉時新風量比較大,因此在選擇時應根據建設和運轉條件綜合考慮。
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