1.滅菌溫度應是一個溫度范圍，而不是一個固定值
通常，高壓蒸汽滅菌溫度是一個固定值，如，試管斜面培養基和搖瓶液體培養基的滅菌要求為：121℃，20min，但在121℃只是滅菌溫度的下限，實際的滅菌溫度在121℃～124℃(或123℃)之間波動。如果是自動控溫型滅菌鍋，設定好滅菌溫度下限為121℃后，當溫度升到124℃(或123℃)時，自動斷電停止加熱，當溫度降到121℃時，自動開始加熱；如果是手動控溫型滅菌鍋，當溫度升到124℃時，手動切斷電源停止加熱，當溫度降到121℃時，手動接通電源開始加熱。
2.不同類型高壓蒸汽滅菌鍋對排放冷空氣的不同要求
1)非自動控溫型滅菌鍋多為小型滅菌鍋
對于這類滅菌鍋必須排凈冷空氣，如果不排凈冷空氣，冷空氣熱膨脹后對壓力鍋的工作壓力有所貢獻，此時壓力和溫度不能一一對應，顯示的溫度比鍋內的實際工作溫度高，滅菌鍋的工作溫度不能達到設定的殺菌溫度，會影響滅菌效果。
2)自動控溫型滅菌鍋
自動控溫型滅菌鍋通過熱敏電極監測鍋內溫度變化，顯示屏上顯示的溫度是鍋內真實的工作溫度，在冷空氣沒有排凈的情況下，也能夠保證滅菌的溫度要求。由于飽和水蒸汽的滅菌效果好，所以在使用自動控溫型滅菌鍋時，也應該排放冷空氣，提高滅菌效果，鍋下通常設有排水排氣閥，滅菌時可將排水閥向左(向右為排水)旋轉少許，讓少量蒸汽排出，也有的滅菌設備上設有可調排氣閥，滅菌時，始終保持排氣閥處于微開狀態，可起到排出冷空氣的作用。
