樣品實驗方案

簡要概述

1.在生長培養(yǎng)基中準備細胞
2.準備并向細胞添加Cellpaint Green工作溶液
3.在37℃下孵育5至20分鐘
4.使用FITC濾光片組讀取熒光強度

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
Cellpaint 綠色原液（500X）：
將100 uL DMSO（組分C）添加到Cellpaint Green（組分A）小瓶中，制成500X儲備溶液。 注意：20 µL Cellpaint Green 500X儲備溶液足以用于一個96孔板。 如果管密封嚴密，可以將未使用的Cellpaint Green 500X儲備溶液分裝并在≤-20oC下保存1個月。 避光并避免重復(fù)的凍融循環(huán)。

2.工作溶液配制

Cellpaint 綠色工作溶液（1X）：
將20 uL的500X儲備溶液添加到10 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合。 注意：我們建議在使用前使工作溶液新鮮。

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樣品示例及操作

圖1.在玻片上，Cellpaint Green與Hoechst 33342共染色的HL-60細胞的熒光圖像。 使用熒光顯微鏡，使用帶有FITC濾鏡的60X油鏡對細胞成像。 由于來自細胞邊界上方和下方的膜的所有熒光信號均被不加選擇地捕獲，因此圖像顯得更加刺破和擴散。 與常規(guī)的落射熒光成像相比，共聚焦熒光成像比常規(guī)的落射熒光顯微鏡更靈敏，可以為您提供更多的控制。 如果可以使用共聚焦顯微鏡，則可能會獲得清晰的細胞膜成像。