樣品實驗方案

簡要概述

1.準備細菌樣本
2.準備并將MycoLight 染料工作溶液添加到細菌樣品中
3.在室溫下與MycoLight 染料工作溶液在黑暗中孵育15分鐘
4.使用FITC和TRITC濾光片組通過熒光顯微鏡或熒光光譜分析樣品

溶液制備

1.工作溶液配制

1.1MycoLight 染料工作溶液：
在試管中混合等體積的MycoLight 綠色（組分A）和MycoLight 紅色（組分B），并充分混合。

樣品示例及操作

1.細菌樣品的制備

1.1準備濃度約為107cells / ml的細菌樣品。 在適當的培養基中使細菌生長到對數后期。 注意：在波長= 600 nm（OD600）處測量細菌培養物的光密度，以確定細胞數。 對于大腸桿菌培養，OD600 = 1.0等于8 x 108細胞/ ml。

1.2通過以10,000 x g離心10分鐘除去培養基，然后將沉淀重新懸浮在ddH2O中，將細菌濃度調節至?107細胞/ ml。

2.染色方案

2.1向100 µL細菌懸液中加入2 µL MycoLight 染料工作溶液。

2.2充分混合并在室溫下于黑暗中孵育15分鐘。

2.3用熒光顯微鏡通過FITC（Ex / Em = 488/530 nm）通道監測革蘭氏陰性細菌的熒光，并通過TRITC（Ex / Em = 540/620 nm）通道監測革蘭氏陽性細菌的熒光。 注意：該試劑盒僅提供指導，應根據不同的細菌菌株或其他特定需求進行優化。 注意：該試劑盒中的革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的相對比例也可以通過熒光光譜法估算。