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Cell Explorer 固定化細(xì)胞示蹤試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于標(biāo)記活細(xì)胞的試劑盒，我們的熒光成像試劑盒是一套用于標(biāo)記細(xì)胞的工具，用于細(xì)胞功能的熒光顯微鏡研究。細(xì)胞的有效標(biāo)記為研究時(shí)空背景下的細(xì)胞事件提供了一種有力的方法。這種特殊的試劑盒設(shè)計(jì)用于以綠色熒光均勻標(biāo)記活細(xì)胞，用于需要將熒光標(biāo)簽分子保留在細(xì)胞中相對(duì)較長(zhǎng)時(shí)間的研究。單元可以固定以保留成像圖案。該試劑盒使用帶有細(xì)胞保留部分的非熒光染料。染料進(jìn)入活細(xì)胞時(shí)會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈的熒光，并被捕獲在活細(xì)胞內(nèi)部以在相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供穩(wěn)定的熒光信號(hào)。該染料是疏水性化合物，易于滲透完整的活細(xì)胞。它可以很容易地適應(yīng)各種熒光平臺(tái)，例如微孔板檢測(cè)，免疫細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞儀。它可用于多種研究，包括細(xì)胞粘附，趨化性，多藥耐藥性，細(xì)胞生存力，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。該試劑盒為所有基本組件提供了優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Cell Explorer 固定化細(xì)胞示蹤試劑盒。

適用儀器

流式細(xì)胞儀
Ex:	350 nm or 405 nm
Em：	450/40 nm
通道:	Pacific Blue 通道

熒光顯微鏡
Ex:	DAPI 濾波片組
Em：	DAPI 濾波片組
推薦孔板:	黑色透明底板

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備樣品
2.添加Track It 綠色工作解決方案
3.將細(xì)胞在室溫下染色15至30分鐘
4.清洗細(xì)胞
5.在帶有FITC濾光片（Ex / Em = 490/520 nm）的熒光顯微鏡下或帶有FL1通道的流式細(xì)胞儀（Ex / Em = 490/525 nm）下檢查標(biāo)本

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Track It 綠色原液（1000X）：
將20 µL DMSO（組分C）添加到Track It Green（組分A）的小瓶中，并充分混合以制成1000X Track It Green儲(chǔ)備液。

2.工作溶液配制

以1：1000的比例將1000X Track It Green儲(chǔ)備溶液稀釋到測(cè)定緩沖液（組分B）中，制成Track It Green工作溶液。注意：對(duì)于不同的細(xì)胞類(lèi)型和/或?qū)嶒?yàn)條件，應(yīng)憑經(jīng)驗(yàn)確定Track It Green的濃度。通常，長(zhǎng)期染色（約3天以上）或使用快速分裂的細(xì)胞需要1：500的稀釋度以使染料濃度加倍。對(duì)于較短的實(shí)驗(yàn)（例如生存力測(cè)定），可能需要使用濃度低至1：2000稀釋的染料。為了維持正常的細(xì)胞生理狀態(tài)并減少潛在的偽影，應(yīng)將染料的濃度保持在盡可能低的水平。

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樣品示例及操作

1.將等體積的Track It Green工作溶液添加到細(xì)胞孔中。例如，對(duì)于96孔板，將100 µL /孔的Track It Green工作溶液添加到細(xì)胞中。

2.將細(xì)胞在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育15至30分鐘。

3.用HHBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞3次。注意：或者，請(qǐng)?jiān)诖藭r(shí)修復(fù)單元格。將固定的細(xì)胞保存在4°C，然后再對(duì)細(xì)胞成像。

4.使用帶有FITC濾光片的熒光顯微鏡（Ex / Em = 490/520 nm）對(duì)細(xì)胞成像，或使用FL1通道的流式細(xì)胞儀（Ex / Em = 490/525 nm）監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。