樣品實驗方案

1.蛋白質沉淀：

1.1均質和離心后，制備蛋白濃度小于50 mg / mL的澄清溶液樣品。 將蛋白質樣品放在冰上。 注意：高蛋白濃度的樣品可能需要稀釋。

1.2向100 µL蛋白質樣品中加入10 µL冷的TCA（組分A）并短暫渦旋混合均勻。

1.3將樣品在冰上放置10分鐘。 以12,000 rpm離心5分鐘。 將上清液（去蛋白樣品）轉移到另一個試管中。 注意：建議中和TCA中的樣品，并立即用于相關測定。 但是，TCA中的脫蛋白樣品可以在-70°C下保存長達一個月。

2.TCA中和：

2.1要中和過量的三氯yi酸，可在收集的上清液中加入10 µL冷中和溶液（組分B），并短暫渦旋混合均勻。

2.2將樣品在冰上放置5分鐘。 現在將樣品脫蛋白并中和。

2.3（可選）讀取280 nm（OD）處的吸光度以檢查樣品是否脫蛋白。

樣品示例

      添加TCA和中和溶液（總體積約120 µL）可稀釋原始樣品（初始樣品體積為100 µL）中的蛋白質濃度。 稀釋系數可以通過以下公式計算：

      原始蛋白質濃度％=（初始樣品體積）/（初始樣品體積+ TCA體積+中和溶液體積）