張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>鏈霉抗*蛋白標記物>>綴合物>> 46006鏈霉親和素-Xtra IF647綴合物
Ex (nm) | 656 | Em (nm) | 670 |
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分子量 | ~52000 | 溶劑 | Water |
儲存條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
鏈霉親和素-Xtra IF647綴合物廣泛用于和生物su綴合物結合以檢測多種生物靶標,例如蛋白質,核酸和其他分子。它們被用作許多生物檢測的理想選擇,例如免疫熒光顯微鏡,流式細胞術,蛋白質印跡和其他生物應用,因為鏈霉親和素具有很強的親和力結合生物su,在廣泛的pH和溫度范圍內都不會受到影響。AAT Bioquest®提供多種標記有經典熒光染料的鏈霉親和素偶聯物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及我們優異的水溶性,光穩定性iFluor 和mFluor 染料。然而,常規的生物su-親和素檢測系統仍然受到現有熒光綴合物有限信號強度的限制。鏈霉親和素Xtra iFluor綴合物是超亮鏈霉親和素綴合物的新家族,其激發和發射性能與Alexa Fluor熒光團幾乎相同,信號增強了3到5倍。它是在細胞成像或流式細胞儀中檢測低豐度靶標的一組強大工具。iFluor 647是Cy5通道成像中常見的深紅色熒光色之一。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的鏈霉親和素-Xtra IF647綴合物。
適用儀器
流式細胞儀 | |
Ex: | 633nm |
Em: | 660/20nm |
通道: | APC通道 |
熒光顯微鏡 | |
Ex: | Cy5 濾波片組 |
Em: | Cy5 濾波片組 |
推薦孔板: | 黑色透明底板 |
樣品實驗方案
溶液配制
1.儲備溶液配制
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
鏈霉親和素-Xtra 儲備溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46006和1 mL的Cat#46007的ddH2O,制成1mg/mL的儲備溶液。注意:此重組溶液在4°C儲存并避光保存后,可穩定保存6個月而無明顯變化。為了更長的存儲時間,可以將重構的溶液分成單次使用的等分試樣,或者不分裝添加等體積的甘油(濃度為50%),然后將溶液存儲在-20°C(避光)。
2.工作溶液配制
鏈霉親和素-Xtra 工作溶液:對于IF,建議的染色濃度為1-5 ug / ml。對于FACS,建議在染色濃度為0.1-0.5 ug / 100 uL /百萬細胞。注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色緩沖液。 注意:為了獲得每種應用的性能,需要仔細確定該試劑的濃度。注意: 建議的工作稀釋度僅供參考,建議用戶在測試中使用適當的陽性和陰性對照對產品進行滴定。
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樣品示例及操作
按照說明書中的建議用目標抗體封閉和處理樣品。
在樣品中以適當的濃度和持續時間添加生物su偶聯的二抗工作溶液。注意:請驗證您的生物su偶聯抗體與實驗中使用的一抗的相容性和類型。例如,如果一抗是小鼠抗體,則與生物su結合的山羊抗小鼠抗體可用于該測定。
在室溫下用鏈霉親和素-Xtra 工作溶液孵育細胞30分鐘至1小時。 注意: 孵育的時間需要仔細確定。
取出工作溶液,然后將細胞重懸在緩沖液中。
使用熒光顯微鏡拍攝圖像或使用流式細胞儀記錄強度。
圖1.用鏈霉親和素-Xtra iFluor 綴合物和鏈霉親和素Alexa Fluor 綴合物染色的Hela細胞圖像。Hela細胞用4%多聚甲醛固定30分鐘,用0.02%Triton X-100透化10分鐘,并用1%BSA封閉1小時。然后將固定的Hela細胞在室溫下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠單克隆抗體染色1小時,然后用GxM IgG-生物su(貨號16729)染色,然后用Streptavidin-Xtra iFluor 647和Streptavidin-Alexa Fluor 647染色。細胞核用Hoechst 33342(藍色,貨號17535)染色。
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