圖1.時間分辨熒光能量轉移（TR-FRET）是時間分辨熒光法（TRF）與F?rster共振能量轉移（FRET）的實際結合，為藥物發現研究人員提供了強大的工具。 TR-FRET將TRF的低背景方面與FRET的均相測定形式結合在一起。除更高的通量和更少的假陽性/假陰性結果外，所得測定法還提高了靈活性，可靠性和靈敏性。 FRET涉及兩個熒光團，一個供體（例如trFluor Eu和trFluor Tb）和一個受體。如果能量源（例如閃光燈或激光器）對供體的激發，則如果兩者在給定的彼此鄰近范圍內，則將能量轉移至受體。受體繼而以其特征波長發射光。該技術的FRET方面受多種因素驅動，包括光譜重疊和所涉及的熒光團的鄰近性，其中僅當施主與受主之間的距離足夠小時才發生能量轉移。實際上，FRET系統的特征在于F?rster半徑（R0）：FRET效率為50％時熒光團之間的距離。對于許多FRET配對，R0介于20至90?之間，具體取決于所使用的受體和檢測中熒光團的空間排列。通過測量這種能量轉移，可以通過將每個配偶與熒光標記偶聯并檢測能量轉移的水平來評估生物分子之間的相互作用。可以檢測受體發射作為能量轉移的量度，而無需將結合的與未結合的測定成分分開（例如過濾或洗滌步驟），從而減少了測定時間和成本。