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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>熒光素>> 16316Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒 抗體

Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒 抗體

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號16316

品       牌AAT Bioquest

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-31 18:57:40瀏覽次數:137次

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張經理

biolite
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Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒是強氧化物質和高活性硝化劑。過氧亞硝酸鹽由超氧化物自由基與細胞內產生的一氧化氮之間的反應形成。

Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒 綠色熒光 是美國AAT Bioquest生產的用于檢測亞硝酸鹽的試劑盒,過氧亞硝酸鹽(ONOO-)是強氧化物質和高活性硝化劑。過氧亞硝酸鹽由超氧化物自由基與細胞內產生的一氧化氮之間的反應形成。 它可以破壞各種生物分子,包括蛋白質,酶,脂質和核酸,最終導致細胞死亡。 由于其極短的半衰期和低穩態濃度,檢測和量化溶液中的過氧亞硝酸鹽一直是一項挑戰。 為了滿足這一需求,AAT Bioquest的Amplite 熒光過氧亞硝酸鹽定量試劑盒提供了一種靈敏的工具來測量溶液中的ONOO-。 DAX-J2 PON Green 99與ONOO-反應生成亮綠色熒光產品。 它特異性地與ONOO-反應,對其他活性氧(ROS)和活性氮物質(RNS)具有高選擇性。 該試劑盒可與熒光酶標儀和光譜儀配合使用。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒 綠色熒光 。

適用儀器


熒光酶標儀
Ex:490 nm
Em:530 nm
Cutoff:515 nm
推薦孔板:黑色孔板
實驗方案

樣品實驗方案 

溶液制備 

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環。
1.1 DAX-J2 PON Green 99儲備溶液(500X):
在DAX-J2 PON Green 99(組分A)的小瓶中加入20 µL DMSO(組分C),制成500X儲備溶液。注意:20 µL的復配DAX-J2 PON Green 99儲備溶液足以容納1個板,遠離光線。

1.2 過氧亞硝酸鹽(ONOO)儲備溶液(未提供):
根據文獻報道合成了過氧亞硝酸鹽儲備溶液。簡而言之,用鹽酸(0.6M)酸化亞硝S鈉(0.6M)和過氧化氫(0.7M)的混合物,并在1-2秒內加入氫氧化鈉(1.5M)以使溶液呈堿性。使溶液通過短的二氧化錳柱除去過量的過氧化氫。過亞硝酸鹽溶液在0.1 M NaOH中的消光系數在302 nm下為1670 M-1cm-1。 ONOO的儲備溶液不穩定。我們強烈建議使其新鮮使用。

 

2.標準溶液

過氧亞硝酸鹽標準
在測定緩沖液(組分B)中稀釋過氧亞硝酸鹽(ONOO)儲備液,以得到20 µM ONOO 標準溶液,然后進行1:2連續稀釋,以得到連續稀釋的ONOO 標準溶液(O7-O1)。

  

3.工作溶液

將20μL的500X DAX-J2 PON Green 99儲備溶液添加到10 mL的測定緩沖液(組分B)中并充分混合。 注意:此分析混合物足以用于一個96孔板,避光。

 

樣品操作及實驗分析

表1.黑色96孔微孔板中ONOO標準品和測試樣品的布局。 O = ONOO標準(O1-O7,0.313至20 µM); BL =空白對照; TS =測試樣品

BLBLTSTS
O1O1......
O2O2......
O3O3

O4O4

O5O5

O6O6

O7O7

表2.每個孔的試劑組成

容積試劑
O1-O750ul系列稀釋液(0.313至20 µM)
BL50ul分析緩沖液
TS50ul測試樣品

1.根據表1和表2提供的布局,準備ONOO標準品(O),空白對照(BL)和測試樣品(TS)。對于384孔板,每孔使用25 µL試劑代替50 µL。

2.將50 µL工作溶液添加到ONOO標準,空白對照和測試樣品的每個孔中,以使ONOO測定總體積為100 µL /孔。 對于384孔板,請向每個孔中添加25 µL工作溶液,總體積為50 µL /孔。

3.在避光條件下,于室溫下孵育反應5至10分鐘。

4.使用熒光板讀數器監測Ex / Em = 490/530 nm(在515 nm處截止)的熒光增加。

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