簡要概述

1. 在96孔板中制備細胞（100 µL /孔）

2. 每空加入10ul WST-8TM溶液

3. 在37°C孵育1-4小時

4. 監測OD = 460 nm處的吸光度

如果將WST-8TM溶液保存在4°C并避光，其穩定性可超過一年。 將其存放在<-20°C的溫度下以便更長的存儲時間。

操作步驟

細胞增殖和細胞毒性檢測

1. 在具有透明底部的組織培養微孔板中培養細胞（5000到10,000個細胞/孔板）。

2. 將測試化合物添加到細胞中，并在37°C，5％CO2的培養箱中孵育，所需的時間根據具體實驗而定（例如24、48或96小時）。 對于空白孔（不含細胞的培養基），添加相同量的測試化合物。 對于96孔板，建議的總體積為100 µL，對于384孔板，建議的總體積為50 µL。 注意：應單獨評估每種細胞系，以確定增殖或細胞毒性誘導的細胞密度。 對于增殖測定，使用較少的細胞； 對于細胞毒性測定，請使用更多的細胞。

3. 向每個孔中加入10 µL /孔（96孔板）或5 µL /孔（384孔板）的WST-8TM溶液。

4. 將板在37°C下孵育1-4小時，避光。 注意：孵育時間可能從30分鐘到過夜，具體取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。 優化每個實驗的孵育時間。

5. 用吸光度板酶標儀在OD = 460 nm處監測吸光度的增加。

細胞計數檢測

1. 在具有透明底部的組織培養微孔板中準備細胞培養物。 對于96孔板，建議的總體積為100 µL；對于384孔板，建議的總體積為50 µL。 注意：我們在透明的底部96孔板中使用了連續稀釋的HeLa和Jurkat細胞懸浮液進行測定。

2. 向每個孔中加入10 µL /孔（96孔板）或5 µL /孔（384孔板）的WST-8TM溶液。

3. 將板在37°C下孵育1-4小時，避光。 注意：孵育時間可能從30分鐘到過夜，具體取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。 優化每個實驗的孵育時間。

4. 使用吸光度板讀數器在OD = 460 nm處監測吸光度的增加。