磷酸二酯酶PDE IV底物 FAM-cAMP 綠色熒光 是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的熒光底物，這種綠色熒光cAMP衍生物是磷酸二酯酶（PDE）IV的特定底物。它可用于檢測(cè)PDE IV活性或與FRET讀數(shù)或FP格式的抗cAMP抗體一起篩選PDE IV抑制劑。 PDE是一組降解第二種信使分子的酶：環(huán)狀核苷酸cAMP和cGMP。它們調(diào)節(jié)亞細(xì)胞域內(nèi)環(huán)狀核苷酸信號(hào)傳導(dǎo)的定位，持續(xù)時(shí)間和幅度。因此，PDE是這些第二信使分子介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要調(diào)節(jié)劑。 PDE酶由于其特別的組織分布，結(jié)構(gòu)和功能特性，經(jīng)常成為藥理抑制的靶標(biāo)。 PDE抑制劑可通過(guò)抑制PDE的降解來(lái)延長(zhǎng)或增強(qiáng)cAMP或cGMP介導(dǎo)的生理過(guò)程的作用。在諸如肺動(dòng)脈高壓，冠心病，癡呆，抑郁癥和精神分裂癥等領(lǐng)域，PDE抑制劑被確定為新的潛在劑。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的磷酸二酯酶PDE IV底物 FAM-cAMP 綠色熒光 。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分a試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 FAM-cAMP PDE IV儲(chǔ)備溶液（1 mM）：
將500 µL DMSO加入0.5 umol FAM-cAMP PDE IV底物瓶中，制成1 mM儲(chǔ)備液。

2.工作溶液

FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物測(cè)定溶液（2X）：
通過(guò)將1 mM FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物儲(chǔ)備溶液稀釋到您的PDE緩沖液（例如10 mM Tris-HCl）中，制成2X FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物測(cè)定溶液 ，pH 7.4、10 mM的Mg Cl2、1 mM的MnCl2）制成200-400 nM的溶液。 注意：僅進(jìn)行測(cè)定所需的足夠數(shù)量。

樣品操作及分析

1.將等體積的PDE IV標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與2X FAM-Cyclic-3'，5'-AMP PDE IV底物測(cè)定溶液混合，并在室溫下孵育至少1小時(shí)。

2.在Ex / Em = 490/525 nm處監(jiān)測(cè)熒光偏振。