Amplite 熒光法葡萄糖氧化酶檢測試劑盒 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的葡萄糖檢測的試劑盒，葡萄糖氧化酶是二聚體蛋白質(zhì)，其催化β-D-葡萄糖氧化成過氧化氫和D-葡糖酸-1,5-內(nèi)酯，其被水解成葡萄糖酸。它廣泛用于測定體液中的葡萄糖以及從飲料，食品和其他農(nóng)產(chǎn)品中去除殘留的葡萄糖和氧氣。此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物傳感器中以檢測葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶檢測試劑盒為溶液中葡萄糖氧化酶的測量提供了一種快速而靈敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行，并且無需分離步驟即可輕松適應(yīng)自動化。該套件使用我們的Amplite Red基板，可實現(xiàn)雙重可錄制模式。熒光信號可以通過熒光酶標(biāo)儀或吸光度酶標(biāo)儀輕松讀取。使用Amplite 熒光葡萄糖氧化酶檢測試劑盒，我們在100μL反應(yīng)體積中檢測到低至0.05 mU / mL的葡萄糖氧化酶。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法葡萄糖氧化酶檢測試劑盒 。

樣品實驗方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備GO工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光強(qiáng)度

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色儲備液（250X）：
將100μLDMSO（組分E）加入到Amplite Red（組分A）的小瓶中。應(yīng)立即使用原液。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰*乙醇存在下，Amplite Red不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT或2-巰*乙醇的終濃度應(yīng)不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH 7-8下進(jìn)行。推薦提供的測定緩沖液（pH 7.4）。

2. HRP庫存解決方案（50X）：
將1mL測定緩沖液（組分B）加入到辣根過氧化物酶（組分C）的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 U / mL）：
將1mL測定緩沖液加入葡萄糖氧化酶小瓶（組分D）中。

4.葡萄糖原液（10X）：
將5mL測定緩沖液加入葡萄糖小瓶（組分F）中。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)
通過將2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋到200μL的測定緩沖液（組分B）中來制備葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 然后取10μL1000mU/ mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行1：100稀釋，得到10mU / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（GOS7）。然后進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋以獲得剩余的連續(xù)稀釋的葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品（GOS6-GOS1）。包括非葡萄糖氧化酶緩沖液作為空白對照。 終的葡萄糖氧化酶濃度應(yīng)低兩倍（即0至5mU / mL）。注意：高濃度的葡萄糖氧化酶可能會因Amplite Red（非熒光產(chǎn)物）的過氧化而導(dǎo)致熒光信號降低。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red儲備液（250X），100μLHRP儲備液（50X）和500μL葡萄糖儲備液（10X）加入4.3 mL分析緩沖液（組分B）中，使總體積為5 mL葡萄糖氧化酶（GO）工作溶液。 避光。