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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>成像試劑盒>> 22411MycoLight 熒光活/死細菌成像試劑盒

MycoLight 熒光活/死細菌成像試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號22411

品       牌其他品牌

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-29 16:46:14瀏覽次數:413次

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MycoLight 熒光活/死細菌成像試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測細菌的試劑盒,該試劑盒提供雙色熒光檢測,通過熒光顯微鏡觀察活細菌和死細菌。MycoLight 520是一種非熒光酯酶底物,可擴散到革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌中

MycoLight 熒光活/死細菌成像試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測細菌的試劑盒,AAT Bioquest的試劑盒提供雙色熒光檢測,通過熒光顯微鏡觀察活細菌和死細菌。MycoLight 520是一種非熒光酯酶底物,可擴散到革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌中。在細菌細胞內非特異性酯酶水解后,產生綠色熒光產物并在細菌內積累。相比之下,碘化丙錠是一種紅色熒光核酸染色劑,只能穿透受損膜的細菌。因此,使用MycoLight 520和碘化丙錠染料的適當混合物,具有完整細胞膜的活細菌發出綠色熒光,而具有受損膜的死細菌產生紅色熒光。試劑盒是一種用于對活/死細菌進行成像的強大工具。可以在Ex / Em = 488 / 525nm(FITC濾光器組)和540 / 620nm(TRITC濾光器組)下熒光測量染色細胞,分別用于活細菌和死細菌。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的MycoLight 熒光活/死細菌成像試劑盒


染色樣品示例

概述

1.準備100X MycoLight 520原液
2.準備細菌樣本
3.加入MycoLight 520和碘化丙錠
4.將細菌樣品與MycoLight 520和碘化丙啶在37°C孵育5-10分鐘或在室溫下孵育60分鐘
5.用FITC和TRITC濾光片組通過熒光顯微鏡分析樣品
注意:在開始實驗之前,在室溫下解凍所有試劑盒組分

操作步驟

       在沒有額外說明的情況下,所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C,避免反復凍融循環。


1.MycoLight 520原液(100X):
將100μLDMSO(組分D)加入MycoLight 520(組分A)的小瓶中。
注意:將儲備溶液儲存在-20°C,避免光照,反復凍融。

2.制備濃度為106至108個細胞/ mL的細菌樣品。 在適當的培養基中將細菌培養到對數晚期。

注意:測量波長= 600 nm(OD600)的細菌培養物的光密度以確定細胞數。 對于大腸桿菌培養物,OD 600 = 1.0等于8×108個細胞/ ml。

3.通過以10,000xg離心10分鐘除去培養基,并將沉淀重新懸浮在測定緩沖液(組分C)中。

4.通過用70%乙醇處理30分鐘,然后煮沸60分鐘,可以制備死細菌。
5.染色
       以下是推薦的方案,應根據不同的細菌菌株或其他特定需求進行優化。 如果觀察到更高的背景,可以在成像之前添加任選的洗滌步驟。
5.1將1μL100XMycoLight 520原液和1μL100X碘化丙啶(組分B)加入到100μL測定緩沖液中的細菌樣品中。
5.2充分混合并在37℃下在黑暗中孵育5-10分鐘或在室溫下孵育60分鐘以獲得染色結果。
5.3通過FITC(Ex / Em = 488 / 530nm)和TRITC(Ex / Em = 540 / 620nm)通道用熒光顯微鏡監測細菌的熒光。








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