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百螢問答之鈣離子熒光探針腔腸素的工作原理是怎樣的

時間:2024/2/23閱讀:60
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鈣測量對于許多生物學研究至關重要,鈣離子熒光探針腔腸素是進行鈣測量的有效工具,跟著小螢一起看看它是怎么工作的吧。

 

1.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素工作原理

 

水母發光蛋白復合物包含22kD的載水母發光蛋白,分子氧和發光體腔腸素。當三個Ca2 +離子與該配合物結合時,腔腸素被氧化為腔腸酰胺,并伴有二氧化碳和藍光的釋放。水母發光蛋白的生物發光對Ca2 +濃度的大約三次方依賴性,可以在?0.1 µM至> 100 µM的寬檢測范圍內測量Ca2 +濃度。與熒光Ca2 +指示劑不同,可以檢測Ca2 +結合的水母發光蛋白而無需照亮樣品,從而自發熒光的干擾。天然腔腸素及其衍生物賦予水母發光蛋白復合物不同的Ca2 +親和力和光譜性質。據報道,用腔腸素hcp重組的重組載脂蛋白水泡蛋白總體上具有發光,同時具有高量子產率和快速響應時間。但是,腔腸素類似物在細胞內重建水母發光蛋白可能相對較慢。含有腔腸素的cp,f或h形式的水母發光蛋白顯示的發光強度是用天然腔腸素重構的脫輔基水母發光蛋白的發光強度的10-20倍。腔腸素h和cp已用于GPCR的HTS篩選測定中。

image.png

鈣離子熒光探針腔腸素化學結構

 

2.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素參數

Ex(nm)      429

Em(nm)      466

分子量      423.46

       Ethanol

存儲條件    保存在-15℃以下,避光防潮

 

 


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