13.在實(shí)驗(yàn)中OD值太高，怎么解決？

答：可以縮短加入CCK-8后的培養(yǎng)時(shí)間。例如：可以把加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間由2小時(shí)縮短為1小時(shí)。此外，可適當(dāng)減少細(xì)胞的數(shù)量。

14.如果OD值太低，怎么解決？

答：可以采取2個(gè)辦法：1、適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量  2、延長(zhǎng)加入CCK-8試劑后的反應(yīng)時(shí)間。

15.應(yīng)該每次做標(biāo)準(zhǔn)曲線嗎？

答：建議每次做。雖然細(xì)胞是一樣的，但是細(xì)胞的狀態(tài)不一定一樣。對(duì)于狀態(tài)不一樣的細(xì)胞，建議每次做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

16.在cck-8顯色過(guò)程中，如何終止反應(yīng)

答:有以下幾種方法（96孔板）：

(1) 在顯色反應(yīng)后，將培養(yǎng)板放置4°冰箱內(nèi)；

(2) 每孔加入10ul 0.1M HCL溶液。

(3) 每孔加入10ul 1%（w/v）的SDS溶液。注：反應(yīng)停止后，應(yīng)在24h內(nèi)測(cè)定

17.如何減少由于CCK-8試劑在孔壁上的殘留所帶來(lái)的誤差

答：可以在加樣前用培養(yǎng)基稀釋CCK-8試劑并混勻后加樣

18.好用的 CCK-8 試劑盒推薦？

答：百螢生物生產(chǎn)的 Cell Counting Kit-8（CCK-8）細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒已廣泛用于生物活性因子的活性檢測(cè)，抗腫瘤藥物的篩選，細(xì)胞增殖的測(cè)定，細(xì)胞毒性檢測(cè)以及藥敏等與細(xì)胞活性和增殖相關(guān)的實(shí)驗(yàn)

19.如何使用CCK-8進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)？

答：通常，使用CCK-8進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的步驟如下：

（1）將需要測(cè)定增殖能力的細(xì)胞均勻懸浮在培養(yǎng)基中，并將其分配到孔板或培養(yǎng)皿中。

（2）在每個(gè)孔中加入CCK-8試劑，并確保試劑均勻分布。

（3）將孔板或培養(yǎng)皿放回培養(yǎng)箱中，進(jìn)行一定時(shí)間的培養(yǎng)，使細(xì)胞與試劑發(fā)生反應(yīng)。

（4）反應(yīng)結(jié)束后，使用吸光度計(jì)測(cè)量吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或控制組進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出細(xì)胞增殖能力的相對(duì)值。

20.CCK-8試劑盒的優(yōu)點(diǎn)是什么？

答：（1）高靈敏度：CCK-8試劑可以對(duì)低細(xì)胞數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，因此對(duì)于罕見(jiàn)細(xì)胞或稀釋的細(xì)胞樣品非常有用。

（2）快速操作：CCK-8試劑盒提供了一種快速而簡(jiǎn)便的方法來(lái)評(píng)估細(xì)胞的增殖情況，通常只需幾個(gè)小時(shí)即可得到結(jié)果。

（3）可行性高：CCK-8試劑盒對(duì)各種細(xì)胞類(lèi)型都具有較好的適用性，可應(yīng)用于多種細(xì)胞培養(yǎng)條件和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

21.有沒(méi)有CCK-8及與其他細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑的特性對(duì)比？

答：圖中提供了多種用于檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法、對(duì)比，供參考

22.CCK-8試劑盒是否有副作用？

答：CCK-8試劑盒是一種常用的細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑，通常在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中使用，并且已被廣泛驗(yàn)證和接受。一般情況下，正確使用CCK-8試劑盒不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生明顯的副作用。CCK-8試劑本身對(duì)細(xì)胞具有較低的毒性。它是一種水溶性試劑，主要由WST-8（水溶性四氧化三氮唑鹽）和電子媒介體1-Methoxy PMS（促進(jìn)電子傳遞）組成。

在CCK-8試劑中，WST-8可被細(xì)胞內(nèi)的代謝活性還原為橙色的水溶性產(chǎn)物，該產(chǎn)物在細(xì)胞外可通過(guò)光學(xué)密度測(cè)量進(jìn)行定量檢測(cè)。1-Methoxy PMS作為電子媒介體，促進(jìn)WST-8的還原反應(yīng)。

當(dāng)CCK-8試劑與細(xì)胞接觸時(shí)，其影響對(duì)細(xì)胞的影響主要來(lái)自WST-8的還原產(chǎn)物。在適當(dāng)?shù)臐舛认拢珻CK-8試劑對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝活性影響較小，并不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成明顯的毒性。

然而，值得注意的是，對(duì)于特定的細(xì)胞類(lèi)型或?qū)嶒?yàn)條件，可能需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證。此外，在使用CCK-8試劑時(shí)，建議遵循相關(guān)的操作規(guī)程和安全指南，確保安全操作和正確解讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

23.CCK-8在實(shí)驗(yàn)時(shí)，每孔應(yīng)該接種多少細(xì)胞？

答：針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)96孔板，貼壁細(xì)胞的最小接種量為1000個(gè)/孔 (100μl培養(yǎng)基)。若為白細(xì)胞，接種量不低于2500個(gè)/孔 (100μl培養(yǎng)基)。如若使用24孔板或6孔板，應(yīng)預(yù)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。

以上是百螢整理的CCK-8試劑盒的問(wèn)題以及解答，大家可以做為參考。