通常情況下,分子生物學研究都是針對組織樣本或者一個細胞群來進行。然而,組織樣本中一般包含多種類型的細胞,即使來自于同一個細胞群的各個細胞間的基因水平、表達水平會存在不同程度的差異,互為異質細胞。以組織或細胞群為起始樣本的研究,可能會因為細胞異質性而獲得錯誤的結果。以腫瘤發生為例,腫瘤的發生是單細胞中多種突變積累演化的結果,一個腫瘤組織中往往會包含處于不同階段的腫瘤細胞甚至前腫瘤細胞。采取組織樣本進行研究,稀有卻重要的基因突變很可能淹沒在背景數據中,而采用單細胞進行實驗則可避免上述的情況出現,獲得更可靠更有意義的結果。
單細胞實驗在腫瘤、干細胞、神經、生殖、微生物學等多個領域以及法醫學中應用廣泛,主要是基于以下特點:
u 單細胞亦包含一個物種全部的遺傳信息;
u 單細胞實驗避免了細胞異質性的干擾,準確性更高。
u 單細胞實驗有利于還原生物事件本身,諸多生物事件如胚胎發育、腫瘤形成及轉移等均以單細胞為起點。
瑞士MMI(Molecular Machines & Industries)公司推出的單細胞獲取平臺為獲取單細胞提供了完整的解決方案,該工作站的建立是基于MMI公司的兩大旗艦產品:CellEctor Plus單細胞分選系統和CellCut Plus激光顯微切割系統:
u CellEctor Plus可從血液、骨髓、制備的組織細胞懸浮等液態體系中挑選出感興趣的單細胞;
u CellCut Plus可從組織切片、貼壁培養細胞中將感興趣的單細胞切割并收集下來。
CellEctor Plus和CellCut Plus均是基于顯微鏡的產品,兩大系統可*整合在一起形成MMI單細胞獲取自動化工作站,以“所見即所得”的方式,幾乎涵蓋所有的單細胞獲取途徑,結合單細胞擴增儀和相關耗材可進行下游基因、蛋白水平的研究。
MMI單細胞獲取自動化工作站通過細胞識別、細胞挑取和細胞轉移三個步驟可以實現對懸浮體系中任何單一類型細胞或稀有細胞(如循環腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞以及血液、骨髓中相關細胞等)的分離,細胞可以轉移到PCR管等后續實驗裝置。MMI公司結合單細胞擴增的相關儀器、耗材形成了單細胞實驗的完整方案。
MMI單細胞獲取自動化工作站可利用固態紫外激光對組織切片等樣本中感興趣的細胞進行切割和收集, “三明治”式的樣本制備方式避免環境尤其是RNase污染,高頻低能的激光幾乎不會造成樣本的損傷,利用粘性管蓋的樣本收集方式既避免污染,又能zui大限度地避免損傷樣本。CellCut Plus還能對貼壁培養細胞進行切割收集。
MMI單細胞獲取自動化工作站采用PTP(Predefined Target Positioning)技術,可將黏性管蓋劃分成若干區域,對組織切片中同種類型細胞進行黏附收集,提高樣品的收集效率,節省成本;通過計量統計可保證下游的核酸、蛋白實驗有足夠的樣本量。
MMI單細胞獲取自動化工作站集合激光顯微切割和自動化毛細管技術,幾乎涵蓋了所有可能的單細胞獲取方式,使得基于單細胞的分析和實驗更為快捷,相信會給腫瘤、干細胞、神經、生殖、微生物學等多個領域的研究者們帶來巨大的便利。
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