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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-13 13:39:33瀏覽次數(shù):337次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱:委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Venezuelan Equine Encephalomyelitis Virus(VEEV)RTPCR
編號:XG-P2255
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲
TrypticaseSoyBrothwithFerrousSulfate
BF839菌計數(shù)選擇培養(yǎng)基 250g 用于脆弱擬桿菌BF839固體平板計數(shù)
SIM培養(yǎng)基 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium 250 用于硫化、動力、吲哚試驗
TTC營養(yǎng)瓊脂250g/瓶用于細菌總數(shù)測定incubationmediaTTC營養(yǎng)瓊脂250g/瓶用于細菌總數(shù)測定
Amies運送培養(yǎng)基管 20支/包 用于致病菌標本的運送保存茜素-β-半乳糖苷肉湯(Aliz-gal肉湯)100g用于食品中大腸菌群快速檢測 進口分裝 鐮孢
抗生素檢定培養(yǎng)基2號高PH8.0-8.2 進口分裝 固氮菌
A-1培養(yǎng)基 進口分裝 奇異變形桿菌ATCC 12453
Culture培養(yǎng)基 進口分裝 側(cè)孢芽胞桿菌 Bacillus laterosporusCOLGALT2 Others Human 人 GLT25D2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0901
CM-H062人腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
Hep-2, 人喉癌細胞系 骨髓瘤,45.6.TG1.7細胞 Hs888Lu(人肺成纖維細胞)
小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤;M5076
CD74 Others Human 人 CD74 人細胞裂解液 (陽性對照)
委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒鮑氏志賀菌凍干粉
河流弧菌
丁醇梭菌(丁醇桿菌)
皺褶假絲酵母
玫瑰色鏈霉菌
青春雙歧桿菌肖醋釹(III)六水合物 NqODYMIUM nitncTq HqXcHYDRcTq 16424-60-7
SAFRANINO番紅O 生物染料級紅棕色至紫紅色粉末RTsigma
高錄醋鉀(*)(易制暴) Potcssium pqrchlorctq
隱色孔雀石綠 AR,99% 25克 國產(chǎn)/進口
鈣試劑/3-羥基-4-(2-羥基-5-基)偶氮-1-磺酸/1-(1-羥基-4--2-苯偶氮)-2-酚-4-磺酸/Calmagite IND 5/25克 國產(chǎn)/進口CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0156MFC(小鼠胃癌細胞)5×106cells/瓶×2
人肝臟細胞裂解物HHL
UACC812細胞,人導(dǎo)管瘤細胞 鼠腹水瘤,EAC-E2G8細胞 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HPASMC Pellet 人肺動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人肝臟細胞裂解物HHL
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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