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產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
產品名稱:葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Stachybotrys spp.PCR
編號:XG-P2110
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
布氏菌選擇性培養基250g用于布氏菌的選擇性分離培養
050190A (胰酪胨) BR 10㎏ incubation media 050190A (胰酪胨) BR 10㎏
粉褶側耳、粉紅側耳 serotype 2b。研究、質量控制。 支/瓶
NA平板(加酶)(9cm)細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用
皮膚癬菌鑒別瓊脂(DTM) 250g 用于皮膚癬菌鑒別培養大鼠脂蛋白磷脂酶A2 進口分裝 Syringin Syringin 118-34-3 C17H24O9 ≥98%
大鼠神經原特異性烯醇化酶 進口分裝 Acetylshikonin Acetylshikonin 54984-93-9 C18H18O6 ≥98%
大鼠三型前膠原N基端肽 進口分裝 Sucrose Sucrose 57-50-1 C12H22O11 ≥98%
大鼠 進口分裝 6,8-Cyclo-1,4-eudesmanediol 6,8-Cyclo-1,4-eudesmanediol 213769-80-3 C15H26O2 ≥98%RBBP4 Others Human 人 RBBP4 / RBAP48 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人腦瘤細胞;SF767
Saos-2細胞,成骨肉瘤細胞 人鼻咽癌細胞,HNE1細胞 CL-0273ECV-304(人臍靜脈內皮細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B
TFPI2 Others Human 人 TFPI2 人細胞裂解液 (陽性對照)
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒3%氯三糖鐵瓊脂255于鑒別副溶血性弧菌的生化反應(GB/T4789.7-2008和SN02)。
M9 Broth-capsule 培養基 5capsules incubation media M9 Broth-capsule 培養基 5capsules
氧化微桿菌 支/瓶
消毒液中和肉湯250g用于中和醇類、酚類消毒劑、含氯消毒劑、含消毒劑、過氧化物消毒劑、季銨鹽類消毒劑、醛類消毒劑等
AeromonasDifferentialAgar化鈉蔗糖瓊脂/SodiumChlorideSucroseAgar副溶血性弧菌的選擇性分離培養250克國產/進口 進口分裝 小角狀節皮菌 Arthroderma corniculatum
克氏檸檬酸鹽培養基/ChristensenCitrateMedium腸桿菌鑒別250克國產/進口 進口分裝 毛木耳 Auricularia polytricha
酵母粉葡萄糖霉素瓊脂/YGC瓊脂/YGCAgar食品中霉素及酵母菌總數測定250克國產/進口 進口分裝 玉米頭孢霉
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎添加劑/BufferedListeriaEnrichmentBrothSupplement加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎中5毫升國產/進口 進口分裝 大病長蠕孢CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R069大鼠腎成纖維細胞*培養基100mL
大鼠肝星形細胞RHSteC
NCI-H596[H596]細胞,人肺癌細胞 人腎癌細胞,SK-RC-42細胞 人肝星形細胞HHSteC
小香豬皮膚細胞;SSC-S2
NCR3 Others Human 人 NKp30 人細胞裂解液 (陽性對照)
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