當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
產品名稱:中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Sinorhizobium spp.PCR
編號:XG-P2104
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
采樣吸取液C液體培養基添加劑支/管每套加入采樣吸取液C液體培養基中
Orange serum agar橙血清瓊脂 1.10673.0500 MERCK默克 incubation media Orange serum agar橙血清瓊脂 1.10673.0500 MERCK默克
Bolton肉湯配套試劑 10支/盒 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎中
SD大鼠神經干細胞*培養基CompleteculturemediumofneuralstemcellsinSDrats
金氏B培養基(KBA) 250g 用于檢測假單胞菌的熒光素巨噬細胞刺激蛋白 進口分裝 松果菊苷 Echinacoside 82854-37-3 C35H46O20 ≥98%
神經原特異性烯醇化酶 進口分裝 Stigmast-4-ene-3,6-dione Stigmast-4-ene-3,6-dione 23670-94-2 C29H46O2 ≥98%
增殖細胞核抗原 進口分裝 1-chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol 1-chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol 78876-52-5 C13H9ClOS ≥98%
1型前膠原基端原肽 進口分裝 3alpha-Akebonoic acid 3alpha-Akebonoic acid 104777-61-9 C29H44O3 ≥98%TFRC Others Cynomolgus 食蟹猴 ansferrin Receptor / TFRC / CD71 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1008
CM-H090人血管內皮細胞*培養基100mL
SGC7901/DDP細胞,人胃癌耐藥株 人骨髓瘤細胞,U266細胞 人肝細胞;HL-7702[L-02]
ES-2(人卵巢透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2
BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照)
中華根瘤菌通用PCR檢測試劑盒30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)250g用于嗜滲酵母檢驗時的樣品稀釋(GB標準)
Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g)
支原體肉湯培養基 Mycoplasma Broth 250克 用于培養支原體的基礎培養基
3mg/支*5每支添加于HB4ncubationmedia3mg/支*5每支添加于HB4155
改良亞鹽瓊脂 250g 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數,平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養和計數(SN標準)FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B)2ml*40A、B各取一支添加于225mlFraser培養基或Half-Fraser培養基中 進口分裝 大腸埃希氏菌(大腸桿菌)
四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯)10ml/支*20支用于沙門氏菌選擇性增菌培養。 進口分裝 地衣形芽孢桿菌
Preston肉湯基礎 進口分裝 植物乳桿菌 ATCC 8014
哥倫比亞血瓊脂基礎(改良) 進口分裝 大豆根瘤菌 ACCC 15067PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
少突膠質細胞培養基OM-prf
Sars結構蛋白表達株;293sars181A
CNE1-lmpl細胞,轉基因鼻咽癌細胞系 小鼠黑色素瘤細胞,B16F1細胞 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基100mL
NIH/3T3(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細胞生長培養基2型套裝 500ml
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