當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T札如病毒2型PCR檢測試劑盒
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Sappovirus(SV)G2RTPCR |
貨號 | XG-P2067 |
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)于醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試(GB/T-2010)
7.5%氯肉湯 250(g) incubation media 7.5%氯肉湯 250(g)
3% NaC1*脫羧酶發酵管 3% NaC1*脫羧酶發酵管 20支 BR
Kovacs氏靛基質試劑盒2用于吲哚(靛基質)試驗配套試劑incubationmediaKovacs氏靛基質試劑盒2用于吲哚(靛基質)試驗配套試劑
改良CCD瓊脂添加劑 1ml*5 用于添加100ml HB0274-1中人*過氧化酶(GSH-Px)ELISAKit 進口分裝 *二鈉 Pemetrexed Disodium : 150399-23-8 質量規格: 美國進口
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISAKit 進口分裝 *二聚體雜質 Quetiapine Dimer Impurity : 945668-94-0 質量規格: 美國進口
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISAKit 進口分裝 去噻唑基甲氧基碳酰 * Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir : 176655-55-3 質量規格: 美國進口
人3-羥基-3-戊二酰*合酶1(HMGCS1)ELISAKit 進口分裝 (Z) 4-羥基乙基它莫西芬-d5 (Z) 4-Hydroxy Tamoxifen Ethyl-d5 : 164365-20-2 質量規格: 美國進口PFKFB3 Others Human 人 PFK2 / PFKFB3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人結直腸腺癌細胞;HT-29
CM-R014大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養基100mL
GBC-SD, 人膽囊癌細胞 猴腎細胞,HepII細胞 TE 354.T(人皮膚基底細胞癌)
綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP
ADAM12 Others Human 人 ADAM12 人細胞裂解液 (陽性對照)
札如病毒2型PCR檢測試劑盒AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克
改良的McBride瓊脂MMA 250g 用于單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(GB/T4789.30-2003,SN0184-93)。
曲霉素瓊脂基礎(AFPA)AFPA用于曲霉菌分離培養
BifidobacteriumBSMedium1 x GTE buffer 進口分裝 動脈內皮細胞
1-溴3-氯丙烷(>97%,BR) 進口分裝 癌組織細胞
2-溴代萘 進口分裝 腸平滑肌細胞
3,4,5-*氧基肉桂酸(>98%,BR) 進口分裝 神經元細胞小鼠骨髓間充質肝細胞(MMSC-bm)(5×105)
人虹膜色素上皮細胞cDNAHIPEpiC cDNA
大鼠腦膠質瘤細胞;C6
環氧長春堿 Pyrrophenone (500 ug)N-[[(2S,4R)-1-[2-(2,4-difluorobenzoyl)benzoyl]-4-[(triphenylmethyl)thio]-2-pyrrolidinyl]methyl]-4-[(Z)-(2,4-dioxo-5-thiazolidinylidene)methyl]-benzamide; Pyrrophenone小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
黃獨素B Varenicline (tartrate) (5 mg)7,8,9,10-tetrahydro-6,10-methano-6H-pyrazino[2,3-h][3]benzazepine-(2R,3R)-dihydroxybutanedioate; CP 526,555-18; Varenicline (tartrate)小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
黃華堿Sitagliptin (phosphate) (1 g)INN|MK 431|ONO-5435; (3R)-3-ami-[5,6-dihydro-3-(trifluoromethyl)-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-7(8H)-yl]-4-(2,4,5-trifluorophenyl)-1-butanone, monophosphate小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
黃杞苷 JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer (1 mg)(6-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 ?
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡膜血管細胞*培養基 100mL
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
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